葛根芩連微丸—鹽酸小檗堿的測定—分光光度法

本方法采用二階導(dǎo)數(shù)分光光度法測定葛根芩連微丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥葛根芩連微丸。

供試品加乙醇加熱回流提取，過濾，濾液用乙醇稀釋制成供試液，置紫外可見分光光度計，繪制二階導(dǎo)數(shù)光譜，計算鹽酸小檗堿的含量。

無水乙醇

1.紫外可見分光光度計

2. 電光分析天平

1. 稱取供試品

精密稱取在60℃干燥1h的本品粉末(過四號篩-65目)約 0.2g

2. 對照品溶液的制備

精密稱取干燥至恒重鹽酸小檗堿對照品4mg，置100mL量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，作為對照品溶液。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

精密量取上述對照品溶液適量，以無水乙醇分別稀釋成2、4、6、8、10 μg/mL的溶液，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4. 供試品溶液的制備

將供試品置于錐形瓶中，加無水乙醇30mL，水浴加熱2h，趁熱濾過，無水乙醇洗滌濾渣和容器2次。合并濾液于50mL量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取此溶液1.0mL置10mL量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一，“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密吸取上述對照品溶液進(jìn)入紫外可見分光光度計，繪制二階導(dǎo)數(shù)光譜圖，讀取在365nm處的峰零間振幅L值，與濃度C進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2.供試品的測定

供試品繪制二階導(dǎo)數(shù)光譜，按標(biāo)準(zhǔn)曲線下操作，計算鹽酸小檗堿含量

注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3－0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計算含量。

徐英瑜、張家康. 二階導(dǎo)數(shù)光譜法測定葛根芩連微丸的含量. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1999，19（1)：31-32.