膽寧片－ 大黃素、大黃酚的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定膽寧片中大黃素、大黃酚的含量。

本方法適用于中成藥膽寧片。

本品加三氯甲烷加熱回流，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)大黃素、大黃酚的吸收值，計(jì)算出其含量。

1.甲醇

2 .30%硫酸溶液

3 .三氯甲烷

4 .0.1%磷酸溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 0.1%磷酸溶液＝80 20

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約0.35g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取大黃素對(duì)照品和大黃酚對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含大黃素12mg、大黃酚1.6mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約0.35g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加30%硫酸溶液10mL，用三氯甲烷加熱回流提取3次（30 mL，20 mL，20 mL)，第一次2小時(shí)，第二、三次每次30分鐘，合并三氯甲烷液提取液于分液漏斗中，用適量的水洗滌，三氯甲烷轉(zhuǎn)移至100 mL量瓶中，加三氯甲烷至刻度，搖勻，精密量3mL，蒸干，殘?jiān)�用甲醇溶解，并轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定大黃素（C₁₅H₁₀O₅)、大黃酚（C₁₅H₁₀O₄)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p540。