排石顆粒—總黃酮的測(cè)定—分光光度法

本方法采用分光光度法測(cè)定排石顆粒中總黃酮（以蘆丁計(jì))的含量。

供試品經(jīng)甲醇超聲提取，定容，取一定量上清液加0.1mol/L三氯化鋁與1mol/L 醋酸鉀溶液反應(yīng)，再加氫氧化鈉試液，用50%甲醇定容，放置一定時(shí)間后，置于分光光度計(jì)，于波長(zhǎng)510nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算其總黃酮[以蘆丁（C₂₇H₃₀O₁₆)計(jì)]的含量。

1. 甲醇

2. 10%硝酸鋁溶液

3. 5%亞硝酸鈉溶液

4. 氫氧化鈉試液：取氫氧化鈉4.3g,加水溶解成100mL。

1. 可見(jiàn)分光光度計(jì)

2. 超聲波清洗器

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取在102℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品20mg，置100mL量瓶中，加50%甲醇適量使溶解，搖勻。制成每1mL含蘆丁0.2 mg。

2. 供試品溶液的制備

取供試研細(xì)，取5g或1g（無(wú)糖型)，精密稱(chēng)定，置錐行瓶中，精密加甲醇100mL，稱(chēng)定重量，超聲提取20分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25mL置50mL量瓶中，加水置刻度，即為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

精密量取對(duì)照品溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0 mL、5.0mL，分別置10mL量瓶中，各加50%甲醇至5 mL，加5%亞硝酸鈉溶液0.3 mL ，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液0.3 mL ，放置6分鐘，加氫氧化鈉試4mL，再加50%甲醇至刻度，搖勻，以相應(yīng)的溶液為空白。照分光光度法，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

2. 供試品的測(cè)定

精密量取上述供試品溶液2mL，置10mL量瓶中，50%甲醇至刻度，搖勻，作為空白對(duì)照。另精密量取2mL，置10mL量瓶中，加50%甲醇至5 mL，加5%亞硝酸鈉溶液0.3 mL ，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液0.3 mL ，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液4mL，再加50%甲醇至刻度，照分光光度法，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出供試品中蘆丁的量，計(jì)算。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.594。