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虎杖-大黃素的含量測定方法-HPLC-UV6

  
方法名稱:
  虎杖-大黃素的含量測定-HPLC-UV6
應(yīng)用范圍:
  用于虎杖中大黃素的含量測定
方法原理:
 本品細(xì)粉加甲醇回流提取,稀酸超聲提取、氯仿萃取、經(jīng)液相色譜分離,在254nm處測定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備   HP1100 高效液相色譜儀(AnglientCompany) 包括G1322A 真空脫氣機(jī),G1311A四元泵,G1314A紫外檢測器,HP化學(xué)工作站。超聲波清洗器(上海昆山儀器公司)HHS21-2B電熱恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械五廠)。濾膜:0.45μm,<25mm(上海興亞凈化材料廠) 。

色譜條件  色譜柱:Hypersil ODS (4.6mm ×250mm,5μm),紫外檢測波長:254nm,流速: 1.0mL/min;進(jìn)樣量20μL;流動(dòng)相:甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15)。
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液的制備  精密稱取大黃素對(duì)照品5mg,置50mL量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取大黃素溶液適量,加甲醇配成每毫升含大黃素1μg2μg、4μg、8μg、10μg、20μg6種標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液,分別用0.45μm的微孔濾膜過濾,備用。

供試品溶液的制備   取本品粉末(過四號(hào)篩)約0.5g[同時(shí)另取本品粉末測水分]精密稱定,置50mL錐形瓶中,精密加甲醇25mL,稱定重量,加熱回流30min,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5mL 置50mL 圓底燒瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L 硫酸液10mL,超聲處理5min,再加氯仿10mL,加熱回流1h,冷卻。移置分液漏斗中,用少量氯仿洗滌容器,并入分液漏斗中,分取氯仿層。酸液用氯仿提取2次,每次約8mL,合并氯仿液,以無水硫酸鈉脫水,氯仿液移至100mL錐形瓶中,揮去氯仿。渣精密加甲醇10mL,稱定重量,置水浴中微熱溶解,放冷后,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液作為供試品液
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取對(duì)照品和供試品溶液各20μl進(jìn)樣,測定峰面積值,按外標(biāo)法計(jì)算含量
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:m.jfsoft.net.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  王京霞,許家鸞,朱新顏. 虎杖中大黃素含量的測定. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志 2005,11(3):17~18
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