方法名稱： |
蟲(chóng)草菌粉--核苷類成分的含量測(cè)定--HPLC法 |
應(yīng)用范圍： |
測(cè)定蟲(chóng)草菌粉中核苷類成分的含量 |
方法原理： |
樣品加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在260nm測(cè)定峰面積，標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定各核苷類成分含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 Agilent 1100 高效液相色譜儀(四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器)； |
試樣制備： |
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 對(duì)照品溶液的制備 ①精密稱取尿嘧啶對(duì)照品4. 52 mg置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 452mg·mL-1的溶液。 ②精密稱取尿苷對(duì)照品3.36mg 置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 336mg·mL-1的溶液。 ③精密稱取腺嘌呤對(duì)照品2.04mg 置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 204mg·mL-1的溶液。 ④精密稱取腺苷對(duì)照品2.17mg置10mL量瓶中，加入少量甲醇溶解，并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 217mg·mL-1的溶液。 分別取對(duì)照品溶液各1.0mL混合均勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液0.1，0.5，1.0，1.5，2.0和4.0μL注入高效液相色譜儀以色譜峰峰面積對(duì)進(jìn)樣量回歸，即得。 |
操作步驟： |
依供試品溶液的制備方法，制得蟲(chóng)草粉供試品溶液，取10μL注入高效液相色譜儀進(jìn)行分析，計(jì)算得各核苷含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
袁永生,張莉,許效楓等.反相高效液相法測(cè)定蟲(chóng)草菌粉中核苷類成分的含量.中國(guó)藥學(xué)雜志.2002,37(10):776-778 |
