公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1287857C
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公開(kāi)(公告)日
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2006.12.06
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200410073124.9
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申請(qǐng)日期
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2004.09.29
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專利名稱
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胃癌特異性納米疫苗的制備方法
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主分類號(hào)
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A61K39/00(2006.01)I
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分類號(hào)
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A61K39/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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吳開(kāi)春;師 瑞;吳道澄;寧小萱;丁 杰;樊代明
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地址
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710032陜西省西安市長(zhǎng)樂(lè)西路17號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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西安通大專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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李鄭建
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國(guó)省代碼
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陜西;61
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主權(quán)項(xiàng)
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一種胃癌特異性納米疫苗的制備方法,其特征在于,將人工合成的胃癌特異性抗原MG7模擬表位多肽和免疫佐劑CpG ODN 1645采用納米乳劑包封,所述的胃癌特異性抗原MG7的氨基酸序列為L(zhǎng)ys Pro His Val His Thr Lys,獲得胃癌特異性納米疫苗;具體包括以下步驟: 1)在2ml的雙蒸水中分別加入0.4%重量的司盤-80、吐溫-80;混合均勻得到水相A; 2)在另一加入8.0ml雙蒸水的大試管中,先加入1.6ml的大豆油,然后各加入1.6mg的胃癌特異性抗原MG7模擬表位多肽和免疫佐劑CpG ODN1645,最后加入0.4%重量的司盤-80,混合均勻,得到油相B; 3)在3000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢柘,將油相B逐滴加入到水相A中,滴加完畢后將混合物移至真空高速剪切乳化機(jī)上,在0.7Kpa真空下,以23000轉(zhuǎn)/分剪切40分鐘,2次; 4)剪切后室溫冷卻20分鐘,得到乳白色帶乳光液體,冰浴下超聲3分鐘后再用膜過(guò)濾、除菌后4℃保存,即得到20nm-30nm的胃癌特異性納米疫苗。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了胃癌特異性納米疫苗的制備方法。本發(fā)明利用生物性納米乳劑作為體內(nèi)藥物運(yùn)輸載體,以胃癌特異性多肽抗原MG7為免疫抗原,以含有CpG基序的寡核甘酸(CpG ODN)為免疫佐劑,采用磁力超聲法構(gòu)建共包封有MG7-Ag模擬表位多肽與CpG ODN的納米疫苗。經(jīng)高效液相色譜分析,電鏡觀察以及離心等方法鑒定表明所構(gòu)建的納米疫苗粒徑控制在20-30nm并具有較高的包封率和穩(wěn)定性。疫苗免疫接種后,可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗MG7-Ag特異性抗體以及一定數(shù)量的特異性CTL分泌IFNγ,抗原-佐劑共包封組優(yōu)于單表位抗原單獨(dú)包封組和其他對(duì)照組。腫瘤攻擊后,共包封疫苗免疫組小鼠成瘤體積明顯小于對(duì)照組。這一基因疫苗在胃癌的免疫治療研究,胃癌特異性疫苗的研制方面將具有巨大的潛在價(jià)值。
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國(guó)際公布
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