公開(公告)號 | CN1796562A |
公開(公告)日 | 2006.07.05 |
申請(專利)號 | CN200410094011.7 |
申請日期 | 2004.12.24 |
專利名稱 | 突變型p53基因反義表達載體及其制備方法 |
主分類號 | C12N15/63(2006.01)I |
分類號 | C12N15/63(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 天津醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院 |
發(fā)明(設計)人 | 付 麗;許少峰;張 斌;張媛媛;馮玉海 |
地址 | 300060天津市河西區(qū)體院北環(huán)湖西路天津醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 天津市宗欣專利商標代理有限公司 |
代理人 | 董光仁 |
國省代碼 | 天津;12 |
主權(quán)項 |
一種突變型p53基因反義表達載體,其特征在于該載體上連接有突變的p53外顯子8基因序列: |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種突變型p53基因反義表達載體及其制備方法,屬于基因工程技術。本發(fā)明載體上連接有突變的p53外顯子8基因序列,并能夠轉(zhuǎn)錄出與此突變點特異性結(jié)合的互補反義RNA,從而阻斷突變p53信號的表達;其制備方法是采用免疫組化篩選突變型p53細胞系、PCR-SSCP法及基因測序確定突變的p53外顯子和基因序列,把含有突變位點的p53外顯子8序列插入pGEM3zf(+/-)質(zhì)粒載體的多克隆位點處,構(gòu)建pGEM3zf(+/-)p53exon8’重組載體。這樣制備的反義RNA被直接導入研究細胞內(nèi),因為是直接導入反義RNA本身,所導入的RNA分子量小,較易進入細胞內(nèi),操作簡單;由于體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)能合成較多量的產(chǎn)物,可隨時重復操作,滿足需要的RNA量。 |
國際公布 |