以水溶性共軛聚合物為敏感材料的基因探針的構(gòu)建方法
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公開(公告)號(hào)
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CN1600866A
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公開(公告)日
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2005.03.30
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200410053063.X
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申請(qǐng)日期
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2004.07.22
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專利名稱
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以水溶性共軛聚合物為敏感材料的基因探針的構(gòu)建方法
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主分類號(hào)
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C12Q1/68
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分類號(hào)
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C12Q1/68
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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復(fù)旦大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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黃維;陳國平;范曲立
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地址
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200433上海市邯鄲路220號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海正旦專利代理有限公司
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代理人
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陸飛;沈云
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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以水溶性共軛聚合物為敏感材料的基因探針的構(gòu)建方法，其特征是以水溶性共軛聚合物為熒光指示劑，以核酸肽PNA為分子識(shí)別元件，通過一段線性的DNA單鏈將核酸肽PNA結(jié)合到水溶性共軛聚合物上；其步驟如下：(1)石英玻璃表面清洗后進(jìn)行活化處理；(2)通過自組裝或者共價(jià)鍵方法在石英玻璃上固定帶正電荷的水溶性共軛聚合物；(3)設(shè)計(jì)并合成單鏈DNA作為捕捉探針DNA；(4)設(shè)計(jì)并合成核酸肽PNA分子鏈作為分子識(shí)別元件；(5)將(4)得到的核酸肽PNA分子的5′端通過共價(jià)鍵連接的方法連接上水溶性共軛聚合物的熒光猝滅劑；(6)將步驟(3)得到的捕捉探針DNA和步驟(5)得到的PNA按照摩爾比為0.9∶1～1∶0.9關(guān)系配置成混合溶液；(7)將步驟(2)所得的固定有水溶性共軛聚合物的玻璃放置于步驟(6)所得的混合溶液中，控制溫度使得捕捉探針DNA與PNA分子雜交，同時(shí)捕捉探針DNA通過靜電作用與(2)得到水溶性共軛聚合物結(jié)合在一起，從而將PNA分子錨定于石英玻璃表面上的水溶性共軛聚合物上；(8)取出玻璃后做進(jìn)一步干燥處理，即得到針對(duì)特定堿基序列的目標(biāo)單鏈的探針。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種以水溶性共軛聚合物為敏感材料的基因探針的構(gòu)建方法。它以水溶性共軛聚合物為敏感材料，以核酸肽PNA為分子識(shí)別元件，以DNA單鏈作為捕捉探針；將核酸肽PNA結(jié)合到水溶性共軛聚合物上，連接于PNA分子上的熒光猝滅劑導(dǎo)致水溶性共軛聚合物熒光猝滅，PNA分子與目標(biāo)單鏈雜交后，使得PNA分子上的熒光猝滅劑離開水溶性共軛聚合物，水溶性共軛聚合物熒光恢復(fù)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)單鏈的檢測(cè)。本發(fā)明簡(jiǎn)化了探針的構(gòu)建方法，使得線性探針容易與目標(biāo)單鏈雜交結(jié)合，可廣泛運(yùn)用于分子生物學(xué)、臨床診斷及各種生化分析。
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國際公布
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評(píng)論加載中...
