| 公開(公告)號 | CN1490052A |
| 公開(公告)日 | 2004.04.21 |
| 申請(專利)號 | CN02133236.3 |
| 申請日期 | 2002.10.18 |
| 專利名稱 | 共表達(dá)HIV－1CNB結(jié)構(gòu)蛋白與hIL－6的重組雞痘病毒活載體疫苗 |
| 主分類號 | A61K39/275 |
| 分類號 | A61K39/275;A61P31/12 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍軍需大學(xué)軍事獸醫(yī)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 金寧一;江文正;李子健;張立樹;金洪濤 |
| 地址 | 吉林省長春市西安大路175號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 吉林長春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 白冬冬 |
| 國省代碼 | 吉林;22 |
| 主權(quán)項 | 一種共表達(dá)HIV-1CNB結(jié)構(gòu)蛋白與hIL-6的重組雞痘病毒活載體疫苗，其特征在于：該疫苗提供三株共表達(dá)中國流行株I型人免疫缺陷病毒B亞型(HIV-1CNB)結(jié)構(gòu)蛋白與細(xì)胞因子人白細(xì)胞介素6(hIL-6)的重組雞痘病毒vPUTAIL6-GAG、vPUTAIL6-GP和vPUTAIL6-GE，它們分別共表達(dá)HIV-1CNB核心蛋白gag、外膜蛋白gp120或gag-gp120嵌合蛋白與hIL-6，該三株重組病毒均可刺激機體產(chǎn)生抗HIV-1的特異性體液免疫和細(xì)胞免疫。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的共表達(dá)HIV-1CMB結(jié)構(gòu)蛋白與hIL-6的重組雞痘病毒活載體疫苗的構(gòu)建方法，其特征在于：將HIV-1CNB核心蛋白gag基因和外膜蛋白gp120基因以及二者嵌合后，分別插入到雞痘病毒表達(dá)載體pUTAL復(fù)合啟動子ATI-P7.5×20下游，同時將細(xì)胞因子hIL-6插入到串聯(lián)啟動子P7.5×16下游，構(gòu)建含HIV-1CNB gag、gp120或gag-gp120嵌合基因和hIL-6基因的重組雞痘病毒表達(dá)質(zhì)粒；將構(gòu)建的重組質(zhì)粒與雞痘病毒株在雞胚成纖維細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行同源重組，并用5-溴脫氧核糖尿苷(BUdR)進(jìn)行加壓篩選；重組病毒分別經(jīng)PCR、Western blot和免疫熒光試驗進(jìn)行檢測，篩選陽性重組雞痘病毒；將篩選的陽性重組雞痘病毒分別免疫BALBc小鼠并進(jìn)行免疫學(xué)指標(biāo)的檢測。 |
| 摘要 | 一種共表達(dá)HIV-1CNB結(jié)構(gòu)蛋白與hIL-6的重組雞痘病毒活載體疫苗，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。該疫苗提供三株共表達(dá)中國流行株I型人免疫缺陷病毒B亞型(HIV-1CNB)結(jié)構(gòu)蛋白與細(xì)胞因子人白細(xì)胞介素6(hIL-6)的重組雞痘病毒vPUTAIL6-GAG、vPUTAIL6-GP和vPUTAIL6-GE，它們分別共表達(dá)HIV-1CNB核心蛋白gag、外膜蛋白gp120或gag-gp120嵌合蛋白與hIL-6，該三株重組病毒均可刺激機體產(chǎn)生抗HIV-1的特異性體液免疫和細(xì)胞免疫。本發(fā)明得到的三株重組雞痘病毒對實驗動物是安全的，無任何病理現(xiàn)象出現(xiàn)。具有很好的遺傳穩(wěn)定性，經(jīng)多次傳代后外源基因不丟失，且可在非禽屬動物(如哺乳動物)細(xì)胞中表達(dá)外源蛋白。所使用的目的基因為中國流行株HIV-1 B亞型的結(jié)構(gòu)蛋白基因，從而構(gòu)建的重組雞痘病毒可作為我國預(yù)防和治療AIDS的活載體疫苗。本發(fā)明中重組雞痘病毒表達(dá)的細(xì)胞因子hIL-6起到了免疫佐劑的作用。 |
| 國際公布 |
