公開(公告)號
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CN101100655A
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公開(公告)日
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2008.01.09
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申請(專利)號
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CN200710042044.0
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申請日期
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2007.06.15
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專利名稱
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胚胎源性多能干細胞向心臟起搏細胞定向誘導(dǎo)分化的方法
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主分類號
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C12N5/06(2006.01)I
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分類號
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C12N5/06(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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張 喜;張傳森
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地址
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200433上海市翔殷路800號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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上海德昭知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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丁振英
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種胚胎源性多能干細胞向心臟起搏細胞定向誘導(dǎo)分化的方法,其特征在于該方法包括: I.胚胎源性多能干細胞的分離、培養(yǎng)、鑒定 采用全骨髓直接貼壁法獲得原代培養(yǎng)的細胞,然后按有限稀釋法進行克隆培養(yǎng)獲得該細胞的純化系,通過對CD133、SSEA-1、CD45、Oct-4和Nanog標(biāo)記物的檢測進行鑒定; II.胚胎源性多能干細胞向心臟起博細胞的誘導(dǎo)分化 向胚胎源性多能干細胞施加旁分泌因子、胞外基質(zhì)組分層粘連蛋白、纖維連接蛋白,誘導(dǎo)胚胎源性多能干細胞分化為心臟起搏細胞。
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摘要
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本發(fā)明涉及干細胞誘導(dǎo)分化技術(shù)領(lǐng)域。目前構(gòu)建生物心臟起搏器的細胞移植方法主要是以胚胎源性干/祖細胞和成體間充質(zhì)干細胞作為細胞來源。本發(fā)明利用胚胎源性多能干細胞定向誘導(dǎo)分化心臟起搏細胞,采用全骨髓直接貼壁法獲得原代培養(yǎng)的細胞,按有限稀釋法進行克隆培養(yǎng)獲得該細胞的純化系,通過施加旁分泌因子內(nèi)皮素-1或神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白-1,胞外基質(zhì)組分層粘連蛋白、纖維連接蛋白等基質(zhì)膠;同時轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)起搏基因HCN4的方法體外誘導(dǎo)胚胎源性多能干細胞向起搏細胞方向分化。本發(fā)明提供一種供給廣泛、無免疫原性、不涉及倫理學(xué)問題的起搏細胞來源,為臨床治療病態(tài)竇房結(jié)綜合癥等緩慢性心率失常帶來希望。
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國際公布
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