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養(yǎng)豬疾病問診:豬流行性感冒的確認(rèn)方法哪一些?

豬流行性感冒的確認(rèn)方法哪一些?

感謝大夫?yàn)槲铱焖俳獯稹撊绾沃委熀头乐?/p>
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流行病學(xué)及臨床癥狀和病理變化診斷1.病毒分離技術(shù)。盡早采取發(fā)病2-3天急性病豬的豬鼻拭樣品(鼻腔分泌物)、氣管或支氣管的滲出物作為病料,進(jìn)行病毒分離,采集的病料應(yīng)放人適宜的運(yùn)輸培養(yǎng)液(生理鹽水、甘油鹽水)中,如果樣品在收集后48h內(nèi)能進(jìn)行病毒分離,則應(yīng)保存在4℃以內(nèi)。待檢材料按常規(guī)處理后,接種于9 -11日齡雞胚或犬腎細(xì)胞(MDCK)上,33 -37℃培養(yǎng)3-5天后,采取羊水或細(xì)胞培養(yǎng)物作血凝試驗(yàn)。如陽性,則進(jìn)一步作m凝抑制試驗(yàn)以確定其亞型,如連傳3-5代仍無血凝特性,則可以判為陰性。2.血凝抑制( HI)試驗(yàn)。使用雙份血清,第一份血清樣品采于病豬的急性期,第二份采于2-3周后恢復(fù)期。如果恢復(fù)期血清的抗體效價(jià)比急性期血清高4倍以上,就可以診斷為豬流行性感冒.3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)( ELISA)。ELISA試驗(yàn)程序:純化病毒抗原包被一加入1:40稀釋的待檢血清( 30min)一加入酶標(biāo)抗體( 30min)一加入底物(15min)一加入終止液并測(cè)定OD650nm值。該方法的特異性達(dá)到99.7%。4.熒光抗體實(shí)驗(yàn)(IF)。熒光抗體實(shí)驗(yàn)( FA)用于檢測(cè)冷凍的肺部病灶區(qū)的流感病毒。主要是流感病毒NP或M抗原。用-P抗原的熒光抗體染色,主要出現(xiàn)核內(nèi)熒光;M抗原熒光主要出現(xiàn)胞質(zhì)熒光。將已與熒劑相結(jié)合的豬流感抗體滴加在肺組織的冰凍切片然后在顯微鏡下對(duì)切片進(jìn)行觀察,可鑒別被病毒感染的細(xì)胞。5.分子生物學(xué)診斷技術(shù) 豬流感病毒的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)( PCR)檢測(cè)方法,目前正用于檢測(cè)和區(qū)分流感病毒。
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