方法名稱： |
六味地黃丸—多糖的測定—苯酚-硫酸法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用苯酚-硫酸法測定六味地黃丸中多糖的含量。 本方法適用于中成藥制劑六味地黃丸。 |
方法原理： |
供試品加乙醇加熱回流提取，提取液過濾，濾渣重復(fù)提取2 次，合并提取液，制成供試液，進行電泳。于490nm 處測定吸收度，按多糖的吸收系數(shù)計算其含量。 |
試劑： |
1. 濃硫酸 2. 95%乙醇 3. 無水葡萄糖 4. 苯酚試劑：取苯酚(CP)200g 加鋁片0.2g和碳酸氫鈉0.1g，蒸餾收集182℃ 餾分。 5. 新蒸苯酚配成5%(g/v)的水溶液，搖勻備用。 |
儀器設(shè)備： |
分光光度計 |
試樣制備： |
1.對照品溶液的制備 精密稱取105℃ 干燥至恒重的葡萄糖75mg， 置于小燒杯中加適量蒸餾水溶解，然后定量轉(zhuǎn)移至250ml 量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻備用。 2. 供試品溶液的制備 精密稱取1g 六味地黃丸粉末，加80%乙醇加熱回流提取(100ml×1h)2 次，過濾，殘渣用80 熱乙醇洗滌(10ml×2)后，再用蒸餾水洗滌(100ml×1h)2 次。殘渣用熱蒸餾水洗滌(10ml×2)， 合并水濾液，用蒸餾水定容至250ml ，搖勻備用。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標準曲線的繪制 分別精密量取葡萄糖對照品溶液1.0、 2.0 、3.0 、4.0、5.0、 6.0ml 于50ml 量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度。分別取上述溶液2.0ml 置于25ml 棕色量瓶中，分別加1.0ml 苯酚，混勻，迅速加5.0ml 濃硫酸，振搖5min， 置沸水浴中加熱15min， 再置冷水中冷卻30min ，另以2.0ml 蒸餾水同上平行操作為空白對照，于490nm 處測定吸收度，將上述數(shù)據(jù)作回歸處理得到回歸方程。 2. 供試品的測定 分別精密量取供試品溶液2.0ml ，按“標準曲線的繪制”項下“于50ml 量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度”起，同法操作測定吸收度，由標準曲線得到供試品溶液中多糖含量，進而計算六味地黃丸中多糖的含量。 |
參考文獻： |
汪顯陽， 姚春艷。苯酚-硫酸法測定六味地黃丸中多糖的含量，黑龍江醫(yī)藥科學(xué) ，2000 ，V23(5)：15～16 |
