臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二章　血液一般檢查

紅細(xì)胞（redblood cell,RBC)是血液中數(shù)量最多的有形成分，其主要生理功能是作為呼吸載體攜帶氧氣至全身各組織，關(guān)歷代同維持酸堿平衡。這一功能是通過(guò)其內(nèi)含的血紅蛋白來(lái)完成的。血紅蛋白是一種微紅色的膠體物質(zhì)，由珠蛋白結(jié)合亞鐵血紅素而成，其分子量為64458。它是一種呼吸載體，每克血紅蛋白可攜帶氧1。34ml。研究發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞內(nèi)充滿(mǎn)小顆粒，最小的直徑約不6。5nm，相當(dāng)于一處血紅蛋白分子的直徑，此種顆粒于近紅細(xì)胞膜處最多，越往中心部越少，這一分布與瑞特染色血片上紅細(xì)胞的著色特點(diǎn)，即周邊深，中贈(zèng)部淺呈所謂生理性中心渚染現(xiàn)象是完全一致的。有類(lèi)成熟紅細(xì)胞的直徑為6.7-7.7μm，從正面觀察為圓盤(pán)形，側(cè)面觀呈現(xiàn)單凹或雙凹性圓盤(pán)狀，此外形有利于紅細(xì)胞生理功能的完成。因?yàn)椋孩侔�膜的面積大，便于進(jìn)行氣體交換；②胞膜有盈余，保證紅細(xì)胞易于伸展變形，早然其直徑為6.7-7.7μm ,卻能順利地通過(guò)直徑僅有3μm的脾竇。

紅細(xì)胞起源于骨髓造血干細(xì)胞（CFU--S)在紅細(xì)胞生成素作用下經(jīng)紅系祖細(xì)胞階段，分化成為原紅細(xì)胞，經(jīng)過(guò)當(dāng)選次有絲分裂依次發(fā)育為早幼、中幼和晚幼紅細(xì)胞。晚幼紅細(xì)胞已喪失分裂能力，它通過(guò)脫核而成為網(wǎng)織紅細(xì)胞。此種增殖、分化、成熟的過(guò)程在骨髓中進(jìn)行約需72h。網(wǎng)織紅細(xì)胞再經(jīng)約48h即完全成熟。紅細(xì)胞釋入血液后，平均壽命約120天。衰老紅細(xì)胞主要在脾破環(huán)，分解為鐵、珠蛋白和膽紅素。在正常情況下，由于種種原因破環(huán)這一平衡，均右導(dǎo)致疾病。如紅細(xì)胞生成減烽或契約環(huán)過(guò)多，即可造成各種貧積壓，臨床工作中，可通過(guò)各項(xiàng)細(xì)胞參數(shù)的檢驗(yàn)對(duì)貧血進(jìn)行診斷或鑒別診斷。

第一節(jié)　紅細(xì)胞檢查

一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

[原理]用等滲稀釋將血液稀釋一定脫當(dāng)選后，滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)，然后于顯微鏡下，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)過(guò)換算即可求得每升積壓液中紅細(xì)胞數(shù)。傳統(tǒng)的紅細(xì)胞稀釋是Hayem液，由氯化鈉、結(jié)晶硫酸鈉、氯化高汞溶于蒸餾水制成，其中氯化鈉的作用是調(diào)節(jié)滲透壓，硫酸鈉可提高比密防止細(xì)胞粘邊，氧化高汞為防腐劑，本試劑的主要缺點(diǎn)是如遇高球蛋白血癥患者，由于球蛋白沉淀使紅細(xì)胞容易凝結(jié)。近來(lái)，甲醇枸椽酸鹽稀釋液和到廣泛應(yīng)用，此液優(yōu)點(diǎn)在于配制簡(jiǎn)單，紅細(xì)胞不凝集，并在稀釋小時(shí)后仍然介質(zhì)正常的圓盤(pán)形，急診時(shí)，普通生理鹽水或加1%甲醛的生進(jìn)鹽水液均可體紅細(xì)胞稀釋使用。

[參考值] 成年男性：(4.0～5.5)×10¹²/L

成年女性：(3.5～5.0)×10¹²/L

初生兒：(6.0～7.0)×10¹²/L

[臨床意義]

1．生理變化

（1)年齡與性別的差異：初生兒由于在母體內(nèi)以彌漫方式從母體血液獲得氧氣，通常處于生理性缺氧狀態(tài)，故紅細(xì)胞明顯增高，但在出生2周后就逐漸下降。男性?xún)和��?-7歲時(shí)最低，隨著年齡增大而逐漸上升，到25-30歲時(shí)達(dá)高峰，30歲后隨年齡的逐漸下降，直到60歲時(shí)尚未停止。在女性?xún)和�也隨年齡增大逐漸增長(zhǎng)，到13-15歲時(shí)達(dá)最高值，而后帽于月經(jīng)、內(nèi)分泌等因素影響逐漸下降，到21-35歲維持最低水平后又逐漸升高與男性水平相近（圖2-1)

圖（2-1) 紅細(xì)胞和血紅蛋白的生理變化曲線(xiàn)

男女兩性的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)在15-40歲期間差別明顯，主要可能與在此期間，男性雄性激素水平較高，而睪丸酮有腫進(jìn)紅細(xì)胞造血作用有關(guān)。

（2)精神因素：感情沖動(dòng)、興奮、恐懼 、冷水浴刺激均可使腎上腺素增多，導(dǎo)致紅細(xì)胞暫時(shí)增多。

（3)劇烈的體力勞動(dòng)：主要因勞動(dòng)時(shí)氧需要量增加所致的相對(duì)乏氧等引起，一般成有要安靜時(shí)每分鐘全身耗氧0.3-0.4L肌肉運(yùn)動(dòng)時(shí)可增加到2-2.5L，最高可達(dá)到來(lái)-4.5L此時(shí)由于紅細(xì)胞生成素生成增加而骨髓加速釋放紅細(xì)胞，導(dǎo)致紅細(xì)胞增多。

（4)當(dāng)氣壓低時(shí)，因缺氧刺激，紅細(xì)胞可代償性增生。高山地區(qū)居民和登山運(yùn)動(dòng)員紅細(xì)胞數(shù)均高于正常，乃因大氣稀薄、氧分壓低，人體接受了缺氧的刺激后，血漿中紅細(xì)胞生成素水平升高，引起骨髓產(chǎn)生更多的紅細(xì)胞所致。

（5)妊娠中、后期，為適應(yīng)胎盤(pán)循環(huán)的需要，通過(guò)神經(jīng)、體液的調(diào)節(jié)，孕婦的血漿容量明顯增加而引起血液稀釋?zhuān)?個(gè)月—2歲的嬰幼兒由于生長(zhǎng)發(fā)育迅速所致的造血原料相對(duì)不足；某些老年人造血功能明顯減退等均可導(dǎo)致紅細(xì)胞減少，統(tǒng)稱(chēng)為生理性貧血。

2．病理變化

（1)增多：常見(jiàn)者有三類(lèi)：①相對(duì)性增多：血漿中水分丟失，血液中有形成分也相對(duì)地有所增加，為一種暫時(shí)性假象，多見(jiàn)于脫水血濃縮時(shí)。可因連續(xù)嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、多汗、多尿、大面積燒傷或晚期消化道腫瘤患者，長(zhǎng)期不能進(jìn)食等原因而引起。②絕對(duì)性增多：慢性肺心病、某種腫瘤及某些紫紺型先天性心臟�。ㄈ�法樂(lè)四聯(lián)癥)影響氣體交換時(shí)，紅細(xì)胞數(shù)明顯增高。③真性紅細(xì)胞增多癥：系原央不明的造血系統(tǒng)增殖性疾病，由于本病多同時(shí)有中性粒細(xì)胞和血小板增多，故目前認(rèn)為由多能造血干細(xì)胞受累所致。

（2)減少：由于各種病因?qū)е轮車(chē)�血紅細(xì)胞減少，即病理性貧血。按病因可將貧血分成造血不良、紅細(xì)胞過(guò)度破壞和失血三大類(lèi)，其主要臨床類(lèi)型及形態(tài)學(xué)分類(lèi)的關(guān)系將在第三節(jié)中闡述。貧血的病因?qū)W分類(lèi)見(jiàn)表2-1

表2-1 貧血的發(fā)病機(jī)制和形態(tài)學(xué)分類(lèi)

二、血紅蛋白測(cè)定

（一)血紅蛋白分子結(jié)構(gòu)及成分

血紅蛋白是在人體有核紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)匐成的一種含色素輔基的結(jié)合蛋白質(zhì)。色素部分是亞鐵血紅素，蛋白質(zhì)部分是珠蛋折，血紅素是由原卟啉和鐵原子組成的一種結(jié)合物，亞鐵原子的六個(gè)配位鍵中的四個(gè)與原卟啉的四個(gè)吡咯壞的氮原子相邊，一個(gè)與珠蛋白的肽鏈F肽段第八個(gè)氨基酸------組氨酸的咪唑基相邊，另一個(gè)鍵則可逆性地與氧結(jié)合，完成運(yùn)氧功能。當(dāng)各種原困使Fe²⁺氧化成Fe³⁺即喪失攜氧功能。與一切蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一樣，Hb的珠蛋白部分是由兩條α鏈（α鏈及胚胎時(shí)的ξ鏈)和兩條非α鏈（β鏈、γ鏈、δ鏈及胚胎時(shí)的ε鏈)組成。α鏈由141個(gè)氨基酸組成，β鏈由146個(gè)氨基酸組成。兩對(duì)肽鏈聚合成四聚體、即Hb分子，亞鐵血紅素結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖2-2。

圖2－2　亞鐵血紅素結(jié)構(gòu)式

Hb的合成受激素的調(diào)節(jié),影響Hb合成的激素有兩種.一種是紅細(xì)胞生成素,可促δ-氨基-γ酮戊酸(ALA)生成與鐵的利用,從而促進(jìn)血紅素和Hb 二是雄激素,睪酮在肝臟內(nèi)由5-β還原酶轉(zhuǎn)變?yōu)?-β氫睪酮,它能促進(jìn)ALA合成酶的生成.雄激還能促進(jìn)紅細(xì)胞生成素的生成,直接和間接促進(jìn)Hb的合成.當(dāng)血紅素合成過(guò)多時(shí),血紅素自發(fā)氧化為高鐵血紅素,高鐵血紅素對(duì)ALA合成酶有直接抑制作用,關(guān)能阻遏ALA合成酶生成,進(jìn)而減少血紅素的合成.

在人體不同生長(zhǎng)時(shí)期Hb種類(lèi)與比例不同.在胚胎發(fā)育早期,大約于妊娠第5周,ζ與ε基因即表達(dá)于卵黃囊的成紅細(xì)胞中,形成了人個(gè)體發(fā)育中第一個(gè)有功能的胚胎期血紅蛋白四聚體ζ₂ε₂(HbGower I)在妊娠第6 周,成紅細(xì)胞開(kāi)始由卵黃囊游移到肝臟,此時(shí)ζ表達(dá)水平顯著降低,α和γ基因開(kāi)始表達(dá),由這些肽鏈組成3種胚胎期血紅蛋白,好Hb GowerI(ζ₂ε₂),Hb GowerⅡ(α₂ε₂),HbPortland(ζ₂γ₂)和一種胎兒血紅蛋白HbF（α₂γ₂)，到胚胎發(fā)育第8周，ζ和ε鏈逐漸消失，γ鏈合成達(dá)到最高峰，而且開(kāi)始有β鏈合成，即有成人血紅蛋白HbA（α₂β₂)產(chǎn)生。36周后β鏈合成迅速增加，γ鏈合成速率降低，出生后不久可見(jiàn)β與γ鏈合成大致等量，生后3個(gè)月由于鏈合成繼續(xù)增加，而γ鏈合成迅速降低而至HbA占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，逐步占95%以上。而HbA逐步下降到小于等于1%。δ鏈開(kāi)始合成的確切時(shí)間不很清楚，由于臍帶血中存在微量的δ鏈，說(shuō)明它在胎兒時(shí)期已經(jīng)開(kāi)始合成，出生后占Hb總量的2%-3%。成有血紅蛋白按不攜氧計(jì)算分子量為64458。

在正常狀態(tài)機(jī)體有99%Hb的鐵原婦呈Fe²⁺狀態(tài)，稱(chēng)為還原Hb ,1%o Fe³⁺為高鐵血紅蛋白只有亞鐵狀態(tài)的Hb才能與氧結(jié)合，此時(shí)稱(chēng)氧合血紅蛋白。一氧化碳與可以與Hb結(jié)合碳氧血紅蛋白且其結(jié)合力高于氧結(jié)合力210倍，如果HbO₂在含人有苯肼和硫化氫的環(huán)境中即轉(zhuǎn)變?yōu)榱蚧�血紅蛋白。SHb常可出現(xiàn)在服用阿司匹林和可等待困患者血中。

（二)氰化高鐵積壓紅蛋白測(cè)定法

自從1875年Gower設(shè)計(jì)了稀釋溶血液目測(cè)比色法以來(lái)，血液學(xué)工作者對(duì)Hb測(cè)定進(jìn)行了大量探討，大致分為①根據(jù)Hb分子組成測(cè)定總Hb法（全血鐵法)；②根據(jù)血液物理物性測(cè)Hb(比重法、折射儀法)；③根據(jù)Hb與O₂可逆性結(jié)合的物性測(cè)Hb（血?dú)夥终鄯?和④根據(jù)Hb衍生物光譜特點(diǎn)進(jìn)行的定量測(cè)定法等四大類(lèi)，其中有些方法簡(jiǎn)單易行，而得到長(zhǎng)期廣泛應(yīng)用（如沙利法)，但隨著技術(shù)的進(jìn)步和研究的深入，缺點(diǎn)日漸顯著，逐漸被淘汰。為統(tǒng)一Hb測(cè)定方法，1966年國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員全推薦氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法作為國(guó)際Hb測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)法。1978年國(guó)際臨床化學(xué)聯(lián)合會(huì)和世界病理學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)發(fā)表的國(guó)際性文件中重申了HICN法。

[原理] 血液在血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中溶血后，除SHb外各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化高鐵血紅蛋白，再與CN^-結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵積壓紅蛋白。HICN最大吸收波峰在540nm,最小吸收谷為504nm。特定標(biāo)準(zhǔn)條件下，毫摩爾消光系數(shù)為44L.mmol^-1.cm.因此根據(jù)標(biāo)本的吸光度，即可救是血紅蛋白濃度。HICN吸收光譜曲線(xiàn)特點(diǎn)見(jiàn)圖2-3。

圖2－3　氰化高鐵血紅蛋白光譜吸收曲線(xiàn)

在沒(méi)有符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的分光光度計(jì)的條件下，亦可用HICN參考液制標(biāo)準(zhǔn)曲綞，或耱出換算常數(shù)，間接計(jì)算血紅蛋白濃度（g/l)。

[方法學(xué)評(píng)價(jià)] HICN法具有操作簡(jiǎn)單、顯色快且穩(wěn)定（顯色后如保存得當(dāng)可六年不退色)，除SHb外各種血紅蛋白均可檢測(cè)、讀取吸光度后可直接定值等優(yōu)點(diǎn)。

HICN的消光系數(shù)是44mmol^-1.cm^-1。可根據(jù)下式進(jìn)行計(jì)算：

A/44×64458（mg)/1000×251=A×367.7=Hb（g/l)

式中A 是在540nm處HICN吸光度，64458mg是Hb 的毫克分子量，1000是將毫克轉(zhuǎn)換為克，251是實(shí)驗(yàn)時(shí)血液的稀釋倍數(shù)。但使用367.7這處常數(shù)是有條件的，是基于在儀器，比色杯，試劑及操作均嚴(yán)格的要求下，才能直接使用。儀器的校正是測(cè)定的關(guān)鍵，決定著測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確與否。在實(shí)際工作中，使用的分光光度計(jì)很難達(dá)到上述要求，往往通過(guò)K值來(lái)校正結(jié)果，定期地檢查K值十分重要。HICN法被列為國(guó)際血紅蛋白測(cè)定的參考方法。HICN法逐漸在國(guó)內(nèi)普及，對(duì)Hb測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化起了一定作用，但在實(shí)際應(yīng)用中尚存在一些問(wèn)題，關(guān)非理想的方法。其致命點(diǎn)是KCN有劇毒，使用管理不當(dāng)可造成公害，此外高白細(xì)胞和高球蛋白血癥可致混濁，以及HbCO轉(zhuǎn)化較慢的問(wèn)題也未完全解決。

實(shí)際工作中，多采用替代方法進(jìn)行Hb測(cè)定，將其結(jié)果校下在到HICN法水平。國(guó)內(nèi)多采用十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測(cè)定法，其原理是，除SHb外，血液中各種Hb均可與低濃度SDS作用，生居SDS-Hb棕紅色化合物。其吸收曲線(xiàn)波峰在538nm，小組谷在500nm 肩峰在560nm。由于摩爾消光系數(shù)尚未最后確認(rèn)，因此不能用吸光度A直接計(jì)算Hb濃度。本法可用HICN法定值的抗凝血或溶血液，制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，間接計(jì)算血紅蛋白濃度本法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，呈色穩(wěn)定，準(zhǔn)確性和精確性符合要求無(wú)公害，在全國(guó)臨床檢驗(yàn)方法學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議上，被推薦為次選方法。但SDS本身質(zhì)量差異較大且SDS破壞白細(xì)胞，不適于同時(shí)蛤有計(jì)數(shù)白細(xì)胞和Hb定量?jī)煞N功能和血細(xì)胞分析儀使用。

疊氮高鐵血紅蛋白測(cè)定法具有與HICN相似的優(yōu)點(diǎn)，最大吸收峰在542nm，且峰值高度幾乎與HICN者重合，文獻(xiàn)報(bào)道HICN與HIN₃兩者結(jié)果回歸方程的截距僅為0.013或?yàn)?，實(shí)驗(yàn)時(shí)顯色快且穩(wěn)定。試劑毒性?xún)H為HICN者的1/7，至今仍有人用于臨床，但仍存在公害問(wèn)題。

Zander（1984)年提出堿羥血紅蛋白（AHD575)測(cè)定法，575nm為其檢出波長(zhǎng)。該法試劑簡(jiǎn)單，不含有毒劑。呈色穩(wěn)定，可用氯化血素作標(biāo)準(zhǔn)品，已被許多單位采用。但由于自動(dòng)積壓細(xì)胞分析儀或血紅蛋白測(cè)定儀多采用540nm左右范圍濾光板（圖為HICN最大吸收峰在540nm)，限制了此法在該類(lèi)儀器的使用。

沙利酸化血紅蛋白測(cè)定法。雖操作簡(jiǎn)單但誤差較大，已被列為縣以上醫(yī)院淘汰的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。

近年來(lái)，多參數(shù)血細(xì)胞公析儀的應(yīng)用，使Hb測(cè)定逐步以?xún)x器法取代手工法，其優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、快速，同時(shí)可以獲得多項(xiàng)紅細(xì)胞的參數(shù)，但由于各型號(hào)儀器使用的溶血?jiǎng)┎煌�，形成Hb的衍生物不同。某些溶血?jiǎng)┬蚊娴难苌�物穩(wěn)定性較差（如2%十六基三甲基溴化銨)，因此要嚴(yán)格控制血?jiǎng)┘尤肓考叭苎獣r(shí)間，特別半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件。有些溶血?jiǎng)﹥?nèi)雖加入了KCN，但其衍生拖把關(guān)非是HICN，儀器要經(jīng)過(guò)HICN標(biāo)準(zhǔn)液校正后，才能進(jìn)行Hb測(cè)定。

三、紅細(xì)胞形態(tài)檢查

在良好的染色血涂片上，正常紅細(xì)胞的大小形態(tài)較為一致直徑為6.7～7.7μm,染色淡紅色，中央著色較邊緣淡。各種病因作用于紅細(xì)胞生理進(jìn)程的不同階段引起相應(yīng)的病理變化，導(dǎo)致某些類(lèi)型貧血的紅細(xì)胞產(chǎn)生特殊的形態(tài)變化，可從染色血涂片上紅細(xì)胞的大小、形態(tài)、染色等方面反映出來(lái)。此種形態(tài)學(xué)改變與血紅蛋白測(cè)定、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果相結(jié)合可粗略地推斷貧血原因，對(duì)貧血的診斷和鑒別診斷有很重要的臨床意義。紅細(xì)胞的形態(tài)變化主要表現(xiàn)在以下四個(gè)方面：

（一)紅細(xì)胞大小改變

1．小紅細(xì)胞（microcyte)直徑小于6μm者稱(chēng)為小紅細(xì)胞，正常人遇見(jiàn)。如果血涂片中出現(xiàn)較多染色過(guò)淺的小紅細(xì)胞，提示血紅蛋白合成障礙，可能由于缺鐵引起；或者是珠蛋白代謝異常引起的血紅蛋白病。而遺傳性球形細(xì)胞增多癥的小紅細(xì)胞，其血紅蛋白充盈良好，生理性中心淺染區(qū)消失。

2．大紅細(xì)胞（macrocyte)直徑大于10μm。見(jiàn)于溶血性貧血及巨幼細(xì)胞貧血。

3．巨紅細(xì)胞（megalocyte)直徑大于15μm。最常見(jiàn)于缺乏葉酸及難生素B₁₂所致的巨幼細(xì)胞性貧血。其胞體所以增大是因?yàn)槿狈ι鲜鲆蜃訒r(shí)，幼稚紅細(xì)胞內(nèi)DNA合成不足，不能按時(shí)分裂所致當(dāng)這種幼稚紅細(xì)胞脫核之后，便成如果血涂片中同時(shí)存在分葉過(guò)多的中性粒細(xì)胞則巨幼細(xì)胞性貧血可能性更大。

4．紅細(xì)胞大小不均（anisocytosis)是指紅細(xì)胞之間直徑相差一倍以上而言。常見(jiàn)于嚴(yán)重的增生性貧血血涂片中。而巨連續(xù)劇細(xì)胞性貧血時(shí)尤為明顯，可能與骨髓粗制濫造紅細(xì)胞有關(guān)。

（二)紅細(xì)胞形態(tài)改變

1．球形紅細(xì)胞（spherocyte)細(xì)胞直徑小于正常。厚度增加常大于2μm。無(wú)中心淺染色區(qū)，似球形。常見(jiàn)于遺傳性球形細(xì)胞增多癥和伴有球形細(xì)胞教育界多的其它溶血性貧血。如自身免疫性溶血性貧血、新生兒溶血病以及紅細(xì)胞酶缺陷所致溶血性貧血等。

2．橢圓形紅細(xì)胞（elliptocyte)細(xì)胞呈卵圓形、桿形、長(zhǎng)度可大于寬度3-4倍，最大直徑可達(dá)12.5μm，橫徑可為2.5μm。此種紅細(xì)胞置于高滲、等滲、低滲溶液或正常人血清內(nèi)，其橢圓形保持不變，但幼紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞均不呈橢圓形。在遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥病有血涂片中此種紅細(xì)胞可達(dá)25%，甚至高達(dá)75%（正常人約占1%)。

3．靶形紅細(xì)胞（targetcell)紅細(xì)胞中心部位染色較深，其外圍為蒼白區(qū)域，而細(xì)胞邊緣又深染，形如射擊之靶。有的中心深染區(qū)不像孤島而像從紅細(xì)胞邊緣延伸的半島狀態(tài)或柄狀，而成不典型的靶形紅細(xì)胞。靶形紅細(xì)胞直徑可比正常紅細(xì)胞大，但厚度變薄，因此體積可正常。常見(jiàn)于各種低色素性貧血。在珠蛋白生成障礙性貧血時(shí)尤易見(jiàn)到�？赡芤騂bA含量貧乏而又分布不勻所致應(yīng)注意與在血涂片制作中未及時(shí)固定而引起的改變相區(qū)別。

4．鐮形紅細(xì)胞（sickle cell)形如鐮刀狀。這是由于紅細(xì)胞內(nèi)存在著異常血紅蛋白S所致，在缺氧情況下尤易形成此尖紅細(xì)胞。因此檢查鐮形紅細(xì)胞需將血液制成濕片，然后加入還原劑如偏亞硫酸HbS病。

5．口形紅細(xì)胞（stomatocyte)紅細(xì)胞中央有裂縫，中心蒼白區(qū)呈扁平狀，頗似張開(kāi)的口形或魚(yú)口。在正常人偶見(jiàn)。如積壓涂片中出現(xiàn)較多口形紅細(xì)胞，見(jiàn)于口形紅細(xì)胞增多癥。少量出現(xiàn)可見(jiàn)于彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC)、酒清中毒。

6．棘細(xì)胞（acanthocyte)該紅細(xì)胞表面有針尖狀突起，其間距不規(guī)則。突起的長(zhǎng)度和寬度右不一。在β-脂蛋白缺乏癥病人的血涂片中出現(xiàn)較多。也可見(jiàn)于脾切除后、酒精中毒性肝臟疾病、尿毒癥。須注意與皺縮紅細(xì)胞區(qū)別。皺縮紅細(xì)胞周邊呈鋸齒形排列緊密、大小相等，外端較尖。

7．裂片細(xì)胞（schistocyte)為紅細(xì)胞碎片或不完整的紅細(xì)胞。大小不一。外形不規(guī)則，有各種形態(tài)如刺形、盔形、三角形、扭轉(zhuǎn)形等。正常人血涂片中裂片細(xì)胞小于2%，彌漫性血管內(nèi)凝血、微血管病性溶血性貧血、重型珠蛋白生成障礙性貧血時(shí)出現(xiàn)較多。

8．紅細(xì)胞形態(tài)不整（poikilocytosis)指紅細(xì)胞形態(tài)發(fā)生各種明顯改變的情況而言，可呈淚滴狀、梨形、棍棒形、新月形等，明最常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血。可能因貧積壓嚴(yán)重但又缺乏原料，在骨髓內(nèi)粗制濫造；也可能因紅細(xì)胞性增大，在推片時(shí)碎裂所致。

（三)紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量改變

1．正常色素性（normochmic)正常紅細(xì)胞在瑞特染色的血片中為淡紅色圓盤(pán)狀，中央有生理性空白區(qū)，通常稱(chēng)正常色素性。除見(jiàn)于正常人外，還見(jiàn)于急性失血、再生障礙性貧血和白血病。

2．低色素性（hypochromic)紅細(xì)胞的生理性中心淺染色區(qū)擴(kuò)大，甚至成為環(huán)圈形紅細(xì)胞，提示其血紅蛋白含量明顯減少，常見(jiàn)于缺鐵性貧血、珠蛋白生楊障礙性貧血、鐵幼粒細(xì)胞性貧血，某些血紅蛋白病時(shí)也常見(jiàn)到。

3．高色素性（hyperchromic)指紅細(xì)胞內(nèi)生下性中心淺染區(qū)消失，整個(gè)紅細(xì)胞均染成紅色，而且胞體也大。其平均紅細(xì)胞血紅蛋白的含量是增高的，但平均血紅蛋白濃度多屬于正常。最常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血。

4．嗜多色性（polychromatic)屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞，故細(xì)胞較大，由于胞質(zhì)中含人多少不等的嗜堿性物策RNA而被染成灰色藍(lán)色。嗜多色性紅細(xì)胞增多提示骨髓造紅細(xì)胞功能活躍。在增生性貧血時(shí)增多，溶血性貧血時(shí)最為多見(jiàn)。

（四)紅細(xì)胞中出現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)

1．堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞（basophilicstippling cell)簡(jiǎn)稱(chēng)點(diǎn)彩紅細(xì)胞，指在瑞特治標(biāo)色條件下，胞質(zhì)內(nèi)存在嗜堿性哧藍(lán)色顆粒的紅細(xì)胞，屬于未完全成熟紅細(xì)胞，其粒顆大小不一、多少不等、正常人血涂片中很少見(jiàn)到，僅為萬(wàn)分之一。有鉛、鉍、汞中毒時(shí)增多，常作為名鉛中毒的診斷的篩選指標(biāo)。有人認(rèn)為是由于紅細(xì)胞的膜受重金屬損傷后，其胞質(zhì)中的核糖體發(fā)生聚集性引起，也可能是由于血紅蛋白合成過(guò)程中原卟啉與鐵結(jié)合受陰所致，而雎地伴有再生紊亂現(xiàn)象。

2．染色質(zhì)小體（howelljollys body)位于成熟或幼紅細(xì)胞的胞質(zhì)量，呈圓形，有1-2μm大小，染紫紅色，可1至數(shù)個(gè)，已證實(shí)為核殘余物，常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧積壓及脾切除術(shù)后。

3．卡波環(huán)（cabot ring)在嗜多色性或堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞的胞質(zhì)中出現(xiàn)的紫紅色細(xì)線(xiàn)圈狀結(jié)構(gòu)，有時(shí)繞成8字形�，F(xiàn)認(rèn)為可能是胞質(zhì)中脂蛋白變性所致常與染色質(zhì)小體同時(shí)存在。見(jiàn)于巨細(xì)胞性貧血和鉛中毒患者。

4．有核紅細(xì)胞（nucleatederyhrocyte)即幼稚紅細(xì)胞，存在于骨髓中。正常成人外周血液中不能見(jiàn)到。1周之內(nèi)嬰兒的血涂片可見(jiàn)到少量。在成人外周血涂片中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞屬病理現(xiàn)象，最常見(jiàn)于各種溶血性貧血。由于大量紅細(xì)胞破壞后，骨髓增生，除網(wǎng)織紅細(xì)胞大量入血外，還有一些有核紅細(xì)胞提前釋放入血，這說(shuō)明骨髓的調(diào)節(jié)功能良好。另一種可能是造血系統(tǒng)惡性疾患或其它部位的癌腫轉(zhuǎn)達(dá)移到骨髓，最常見(jiàn)于急、慢性白血病及紅白血病。后者右見(jiàn)更早階段的幼紅細(xì)胞，并伴有形態(tài)上巨幼樣變及其它畸變。

以上各種紅細(xì)胞異常改變見(jiàn)彩圖1。

綜合以上紅細(xì)胞形態(tài)變化，結(jié)合紅細(xì)胞及血紅蛋白減低程度，可以初步作出貧血的形態(tài)學(xué)診斷（表2-2)。

表2－2　常見(jiàn)各類(lèi)貧血的形態(tài)學(xué)診斷簡(jiǎn)表

四、紅細(xì)胞比積測(cè)定和紅細(xì)胞平均指數(shù)的計(jì)算

（一)紅細(xì)胞比積（hematocrit,Hct)測(cè)定

[原理] 將EDTAK₂抗凝血在一定條件下離心沉淀，由引而測(cè)出其紅細(xì)胞在全積壓中所占體積的百分比，稱(chēng)為紅細(xì)胞比積測(cè)定。紅細(xì)胞比積的多少主要與紅細(xì)胞數(shù)量及其大小有關(guān)，紅細(xì)胞比積測(cè)定常用來(lái)診斷貧血并判斷其嚴(yán)重程度，結(jié)合有關(guān)指數(shù)變化還可推斷貧血病因，從而給恰當(dāng)?shù)闹委�。紅細(xì)胞比積測(cè)定對(duì)于相對(duì)性或絕對(duì)性紅細(xì)胞增多癥的診斷及治療觀察也有重要參考價(jià)值。

[方法學(xué)評(píng)價(jià)]測(cè)定紅細(xì)胞比積方法有多種，如折射計(jì)法、沾度法、比重測(cè)定法、離心法、電阻抗法和放射擊性核素法。后者被ICSH定為參考法，非一般實(shí)驗(yàn)室所能開(kāi)展。血細(xì)胞分析儀用微量血即可將紅細(xì)胞比積與其它血細(xì)胞指標(biāo)同時(shí)找印出來(lái)。離心測(cè)定紅細(xì)胞比積不夠精確的關(guān)鍵是無(wú)法完全排除壓積紅細(xì)胞之間的殘留血漿，因此測(cè)定值比真值略高，殘留量一般認(rèn)為約3%。目前溫氏法已屬淘汰之列，漸為微量高速離心法所代頂替，因其用血量少，測(cè)定時(shí)間短，效率高。而且血漿殘留量基本穩(wěn)定，精度（CV)為1%-2%，但對(duì)某些血液病樣品則血漿殘留量仍較多。血細(xì)胞分析儀僅用微量血通過(guò)電阻抗法可進(jìn)行紅細(xì)胞比積測(cè)定。由于其結(jié)果是儀器測(cè)定數(shù)千個(gè)紅細(xì)胞體積產(chǎn)生的脈沖疊加后換算的結(jié)果，因此避免了用微量高速離心法。

[參考值] 溫氏法：男：0.04-0.54;女：0.37-0.47.

微量法：男：0.467±0.039;女：0.421±0.054

[臨床意義] 紅細(xì)胞比積增高可見(jiàn)于大面積燒傷和各種脫水病人，測(cè)定紅細(xì)胞比積后可以了解血液濃縮程度，作為補(bǔ)液計(jì)算的依據(jù)。在各種貧血時(shí)，紅細(xì)胞減少，紅細(xì)胞比積常隨之減低。但可因不同性質(zhì)貧血時(shí)紅細(xì)胞大小不同，兩者的沽低不一定平行，臨床上常用HCT值計(jì)算紅細(xì)胞平均容積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度，有助于貧血的鑒別診斷。

（二)紅細(xì)胞三種平均值的計(jì)算

在同一抗凝血標(biāo)本中同時(shí)計(jì)數(shù)紅細(xì)胞、測(cè)定血紅蛋白量、紅細(xì)胞比積。通過(guò)這三介數(shù)據(jù)，可進(jìn)上步間接計(jì)算出平均紅細(xì)胞容積MCV、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度，以便分析病人紅細(xì)胞形態(tài)特征，有助于貧血的分類(lèi)與鑒別。

1．平均紅細(xì)胞容積（meancorpuscular volume,MCV)

MCV=每升血液中紅細(xì)胞比積/每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)=PCV×10³×10¹²/RBC/Lfl（飛升)

[參考值] 手工法：80-92fl(1mi=10¹²fl),

血液分析法：80-100fl

例：紅細(xì)胞3.50×10¹²/L，紅細(xì)胞比積0.36,則：

MCV=0.36×103×1012/3.50×10¹²=103fl

2．平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量MCH=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)Hb(gL)×10¹²/RBC/L×PG（皮克)

[參考值] 手工法：27-31pg(1g=10¹²pg)

血液分析儀法：27-34pg

例：紅細(xì)胞3.5×1012/L,血紅蛋白120g/L(12g/dl),則

MCH=120×10¹²/3.5×1012=34.2PG

3．平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞比積=Hb/(g/L)/Hct

[參考值] 320-360g/L

例：血紅蛋白120g/L,紅細(xì)胞比積0.36,則：

MCHC=120/0。36=333G/L

（三)三種紅細(xì)胞平均值的臨床意義

紅細(xì)胞檢測(cè)是貧血診斷和療效觀察必在的實(shí)驗(yàn)手段。不同病因引起的貧血，各項(xiàng)參數(shù)變化也不同。了解貧血的病因與病理生理變化，對(duì)于正確使用、合理分析各項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。

骨髓造血活動(dòng)與造血組織中造血干細(xì)胞（稱(chēng)為CFU-S)的存在有密切關(guān)系。造血干細(xì)胞具有自我復(fù)制和分化成各系祖細(xì)胞（包括紅、粒、單核、淋巴系統(tǒng))等的能力。造血干細(xì)胞的增殖和分化又和造成血微環(huán)境有密切聯(lián)系。造血干細(xì)胞向紅系方分化過(guò)程中，經(jīng)歷了一個(gè)受爆增型紅細(xì)胞集落刺激因子與受紅細(xì)胞生成素作用的階段，這個(gè)階段中的細(xì)胞抵消紅系祖細(xì)胞，EPO可以影響這些細(xì)胞的增殖活動(dòng)，刺激血紅蛋白的合成，關(guān)推進(jìn)向紅系細(xì)胞分化。EPO的濃度和培養(yǎng)時(shí)間不同，可形成BFU-E和CFU-E兩種不同的集落。實(shí)BFU-E和CFU-E是紅系祖細(xì)胞中兩類(lèi)性質(zhì)不完全豐同的細(xì)胞亞群，它們?cè)诜只�中的大致順序是CFU-S→BFU-E→…CFU-E→原紅細(xì)胞……網(wǎng)織紅細(xì)胞→成熟紅細(xì)胞。由于某些物理、化學(xué)或生物學(xué)因素?fù)p傷了CFU-S或使干細(xì)胞賴(lài)以生存的骨髓微環(huán)境受到破壞干細(xì)胞不能向紅系轉(zhuǎn)化而形成的貧血稱(chēng)之為再生障礙性貧血，或由于骨髓腫瘤（白血病、骨髓瘤)、骨髓纖維化使紅系祖細(xì)胞條件進(jìn)一步成熟致成骨髓病性貧血。如果紅系祖細(xì)胞受到損傷導(dǎo)致選擇性紅細(xì)胞生成障礙或因腎損傷EPO生成減少使紅系祖細(xì)胞不能進(jìn)一步分化，成熟導(dǎo)致貧血，臨床上分別自然數(shù)為單純紅細(xì)胞性再障礙和腎性貧血。由于上述病因只是作用在細(xì)胞分化階段，并未影響細(xì)胞的增殖和成熟過(guò)程，故成熟的紅細(xì)胞形態(tài)正常，上述貧血均屬正細(xì)胞正色素性，從原細(xì)胞發(fā)育為成熟紅細(xì)胞在經(jīng)過(guò)4次分裂，最后生成16個(gè)紅細(xì)胞，這一過(guò)程中至少有兩個(gè)方面變化---核與胞質(zhì)。所謂核的變化是指DNA要不斷復(fù)制，使細(xì)胞進(jìn)入增殖周期，加速細(xì)胞分裂，由于某種原因便例如葉酸或維生素B₁₂缺乏，DNA復(fù)制所需酶的缺陷或由于抗腫瘤藥物的作用的阻斷DNA復(fù)制均影響幼紅細(xì)胞的分裂從而導(dǎo)致的貧血自然數(shù)為巨幼細(xì)胞性創(chuàng)貧血。胞質(zhì)的改變體現(xiàn)在血紅蛋白不斷合成上。血紅蛋白合成需要三個(gè)要素鐵、卟啉和珠蛋白，其中任何一種物質(zhì)缺乏，均可導(dǎo)致血紅蛋白合減低，細(xì)胞內(nèi)充盈沽少，細(xì)胞體積小并呈明顯大小不等，以小細(xì)胞為主，形成小細(xì)胞低色素性貧血，旯常見(jiàn)的是缺鐵性貧血。成熟的紅細(xì)胞可在以外周血中生存120開(kāi)，衰老的紅細(xì)胞被單核巨噬細(xì)胞所吞噬、破壞、脾在破壞紅細(xì)胞方面尤占重要地位。紅細(xì)胞生存期和紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)、紅細(xì)胞內(nèi)酶系統(tǒng)及血紅蛋白分子等不密切關(guān)系。其中某一方面缺陷即可導(dǎo)致紅細(xì)胞生理或形態(tài)異常，壽命縮短。如膜結(jié)構(gòu)異常導(dǎo)致紅細(xì)胞呈球形、橢圓形、口形、血紅蛋白異常使紅細(xì)胞呈靶形或鐮形，使之不能通地這脾而夭折，臨床上稱(chēng)為溶血性貧血。無(wú)論急性或慢性出血都是臨床上引起貧血的最常見(jiàn)原因，慢性失血性貧血實(shí)質(zhì)上就是缺鐵性貧血。

從以上所述不難看出，不同病因引起的貧血，可使紅細(xì)胞產(chǎn)生形態(tài)的變化。反之，如果用實(shí)驗(yàn)的手段，檢查紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)就可協(xié)助臨床尋找病因，為治療提供依據(jù)。MCV、MCH、MCHC可從不同側(cè)面反映紅細(xì)胞的病理變化。根據(jù)在某一病例中。三個(gè)指數(shù)的變化情況，可將貧血分為大細(xì)胞性貧血、正常細(xì)胞性貧血、小細(xì)胞低色素性貧血及單純小細(xì)胞性貧血，其及標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)致該類(lèi)貧血病因見(jiàn)表2-3。

表2-3 貧血的形態(tài)學(xué)分類(lèi)鑒別表

五、紅細(xì)胞平均直徑和紅細(xì)胞直徑曲線(xiàn)測(cè)定

紅細(xì)胞直徑一般用測(cè)微器在顯微境下直接測(cè)定。由于每個(gè)紅細(xì)胞的直徑并不完全相同，因此必須測(cè)定500個(gè)紅細(xì)胞的直徑，才能求出紅細(xì)胞平均直徑。根據(jù)紅細(xì)胞直徑數(shù)據(jù)繪制出紅細(xì)胞大小分布的曲線(xiàn)，稱(chēng)為Price—jones曲線(xiàn)。正常人及不同病因P-J曲結(jié)特點(diǎn)見(jiàn)圖2-4。

圖2-4 紅細(xì)胞大小分布曲線(xiàn)

[方法學(xué)評(píng)價(jià)]

紅細(xì)胞直徑測(cè)定簡(jiǎn)單易行，不需特殊設(shè)備，對(duì)貧血的鑒別診斷有一定價(jià)值。但由于血涂片厚薄不同及推廣技術(shù)差異，常使紅細(xì)胞產(chǎn)生人為的變化；病理形態(tài)的紅細(xì)胞也影響準(zhǔn)確的直徑測(cè)定，且往往受主觀因素的影響，血細(xì)胞分析儀右根據(jù)測(cè)定量的單個(gè)紅細(xì)胞體積，計(jì)算出體積的變異系數(shù)即RDW（見(jiàn)第三節(jié))，能夠客觀地、準(zhǔn)確地反映紅細(xì)胞大小不等程度，結(jié)合紅細(xì)胞體積直方圖分析，對(duì)貧血和鑒別診斷更有價(jià)值。

[參考值] 平均細(xì)胞直徑6.7-7.7μm

[臨床意義]主要用于貧血的鑒別診斷：小細(xì)胞性貧血時(shí)，紅細(xì)胞直徑小于正常參考范圍，曲線(xiàn)峰頂向左移，反之大細(xì)胞性貧血時(shí)峰頂右移，如有紅細(xì)胞大小無(wú)不均時(shí)，見(jiàn)Price-Jones曲線(xiàn)基底部增寬，如果是正常細(xì)胞性貧血時(shí)，紅細(xì)胞平均直徑及其Price—Jones曲線(xiàn)圖形與正常人的曲線(xiàn)相同。

六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

網(wǎng)織紅細(xì)胞（reticulocyte)是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間尚未完全成熟的紅細(xì)胞。因其質(zhì)內(nèi)尚存留多少不等的嗜堿物質(zhì)，RNA，經(jīng)煌焦油藍(lán)，新亞甲藍(lán)活體染色法染色后，嗜堿物質(zhì)凝聚成顆粒，其顆粒又可聯(lián)綴成線(xiàn)，而構(gòu)成網(wǎng)織狀，此種紅細(xì)胞即網(wǎng)織紅細(xì)胞，仍于骨髓內(nèi)停留一定時(shí)間，然后再釋放入血流。因此骨髓中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，不但比外周血約高3倍。而且亦較幼稚。網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)愈多，表示該細(xì)胞越幼稚，有人將其分成一、二、三、和四級(jí)。即當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)幾乎被網(wǎng)織物充滿(mǎn)者為一級(jí)，而紅細(xì)胞內(nèi)含網(wǎng)織物極少（上個(gè)或幾個(gè)顆粒)者為四級(jí)。通常網(wǎng)織紅細(xì)胞比成熟紅細(xì)胞稍大，直徑為8-9.5μm。

最新血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用，為網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)提供了更進(jìn)的測(cè)試手段。這類(lèi)儀器采用熒光染色和激光測(cè)量的原理，不但能客觀地測(cè)量大量網(wǎng)織紅細(xì)胞，而且還能將其分為高熒光強(qiáng)度、中熒光強(qiáng)度、低熒光強(qiáng)度三類(lèi)，這種分類(lèi)法對(duì)估計(jì)化療后骨髓造血功能的恢復(fù)及骨髓移植效果有較重要的意義。

[方法學(xué)評(píng)價(jià)]由于玻片法容易使混合血液中的水分蒸發(fā)，染色時(shí)間偏短，因此結(jié)果偏低。試管法容易掌握，重復(fù)性效好，必要時(shí)還可以從混合血液中再取標(biāo)本重新涂片復(fù)查，避免再次給被檢者穿刺造成不必要的痛苦，被列為手工法網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)使用米勒窺盤(pán)進(jìn)行計(jì)數(shù)，規(guī)范了計(jì)算區(qū)域，減少了實(shí)驗(yàn)誤差，使結(jié)果準(zhǔn)確性有所提高。

目前，國(guó)外逐步使用網(wǎng)織紅細(xì)胞儀器法測(cè)定大致有流式細(xì)胞儀法，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法和多參數(shù)血液分析儀法。流式細(xì)胞儀法是將紅細(xì)胞染色后使含RNA網(wǎng)織紅細(xì)胞可被計(jì)數(shù)，進(jìn)而得出網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分比和絕對(duì)值，此法是只能計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞當(dāng)選目，不能分析其成熟程度，網(wǎng)只紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是專(zhuān)門(mén)進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞測(cè)定的儀器操作簡(jiǎn)單，只需將抗凝血液吸入儀器內(nèi)，儀器可自動(dòng)染色、自動(dòng)分析，自動(dòng)找印各階段網(wǎng)織紅細(xì)胞的分布圖。結(jié)果準(zhǔn)確。儀器法的優(yōu)點(diǎn)是測(cè)量細(xì)胞多，避免主觀因素，方法易于標(biāo)準(zhǔn)化。但儀器價(jià)格昂貴，尚難以廣泛應(yīng)用。

[參考值] 成人：0.008-0.02或(25-75)×109/L

初生兒：0.02-0.06

[臨床意義]

1．網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)可以判斷骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)造血情況。溶血性貧血時(shí)由于大量網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)入血循環(huán)，可使網(wǎng)織紅細(xì)胞高達(dá)0.20或更高。急性失血后5-10天，網(wǎng)織紅細(xì)胞達(dá)高峰。2周后恢復(fù)正常。典型再生障礙性貧血病例。網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比常0.005。網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)低于5×10⁹/L為診斷再生障礙性貧血的標(biāo)準(zhǔn)之一。

2．網(wǎng)織紅細(xì)胞可作為療效觀察指標(biāo)。凡是骨髓增生功能良好的病人，在給予有關(guān)抗貧血藥物后，其網(wǎng)織紅細(xì)胞在1周左右可百家高峰，貧血嚴(yán)重，網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)升得越高，而且其升高往往在紅細(xì)胞恢復(fù)之前。貧血病有在抗貧血治療過(guò)程中，如果網(wǎng)織紅細(xì)胞不見(jiàn)升高，說(shuō)明該種治療無(wú)效或骨髓造血功能障礙。因此網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是對(duì)貧血病有人經(jīng)常隨訪(fǎng)檢查的項(xiàng)目之一。

3．有人認(rèn)為僅用網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比或者絕對(duì)值表達(dá)嚴(yán)寒不夠確切，若貧血時(shí)骨髓生成紅細(xì)胞增加，大量尚未成熟細(xì)胞釋放入血，這些網(wǎng)織紅細(xì)胞在外周血中成熟時(shí)間需2天。而正常生理情況下骨髓釋放到外周血的網(wǎng)織紅細(xì)胞，在血流中1天后其胞質(zhì)中的RNA即消失。為此Finch提出在貧血時(shí)最好計(jì)處網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)（reticulocyte productionindex,RPI)。它代表網(wǎng)織紅細(xì)胞的生成相當(dāng)于正常人的多少倍。

RPI=網(wǎng)織紅細(xì)胞比值×100/2×病人紅細(xì)胞比積/正常人紅細(xì)胞比積

“2”為網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟時(shí)間（天)，正常人紅細(xì)胞比積，男性為0.45，女性為0.40。如紅細(xì)胞比積正常時(shí)，網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟時(shí)間應(yīng)為1天。網(wǎng)織紅細(xì)胞比值即大油鏡下選擇紅細(xì)胞分布均勻、網(wǎng)織紅細(xì)胞染色好的部分計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，除以1000即為網(wǎng)織紅細(xì)胞比值。

也可用網(wǎng)織紅細(xì)胞校正值（corrected reticulocyte count)報(bào)告（見(jiàn)下式)

網(wǎng)織紅細(xì)胞校正值=網(wǎng)織紅細(xì)胞比值×病人紅細(xì)胞比積/正常人紅細(xì)胞比積

七、點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞堿泣凝集試驗(yàn)

（一)點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

某些重金屬中毒時(shí)，胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)RNA變性沉淀而形成，用瑞特染色，可見(jiàn)紅細(xì)胞的粉紅胞質(zhì)中含有粗細(xì)不等的藍(lán)黑色顆粒，如用堿性美藍(lán)染色法，則點(diǎn)彩紅細(xì)胞的胞質(zhì)呈淡牙綠色，而顆粒為深藍(lán)色，色澤鮮明，易于識(shí)別。

操作時(shí)用油鏡按網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法，計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中，所見(jiàn)點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)，然后除以1000，即為堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞的百分率。

由于點(diǎn)彩紅細(xì)胞較少，分布不勻，有人用擴(kuò)大計(jì)數(shù)面積的辦法計(jì)數(shù)，這比只數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞準(zhǔn)確，可選擇分而均勻區(qū)域，數(shù)50個(gè)視野中點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)，然后計(jì)數(shù)5個(gè)視野內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)，再按下式求出點(diǎn)彩紅細(xì)胞占有比值。

點(diǎn)彩紅細(xì)胞理有比值（百分率)=50個(gè)神野內(nèi)點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)/5個(gè)視野內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)×10

注意：必須選擇紅細(xì)胞分布均勻的區(qū)域計(jì)數(shù)。

[參考值] 不超過(guò)3×10^-4或0.0003

[臨床意義] 點(diǎn)彩紅細(xì)胞明顯增多可見(jiàn)于鉛、汞、硝基苯、苯胺等中毒病人。此外，溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、白血病、惡性腫瘤等也可見(jiàn)增多。

（二)紅細(xì)胞堿粒凝集試驗(yàn)

紅細(xì)胞經(jīng)堿處理破裂后，溢出血紅蛋白成為影細(xì)胞，如紅細(xì)胞殘存著RNA呈顆粒狀凝集而沉積于影細(xì)胞中，再經(jīng)美藍(lán)染色后，可清晰地見(jiàn)到藍(lán)色顆粒。計(jì)數(shù)方法與點(diǎn)彩紅細(xì)胞相似。其意義與點(diǎn)彩紅細(xì)胞相同，這鉛中毒的輔助診斷指標(biāo)之一。

[參考值] 0.004-0.008

[臨床意義]臨床意義與點(diǎn)彩紅細(xì)胞相同。

八、紅細(xì)胞沉降率

紅細(xì)胞沉降率(erythrocyte sedimentationtate,ESR)是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速度而言，簡(jiǎn)稱(chēng)血沉。在健康人血沉數(shù)值波動(dòng)于一個(gè)較狹窄范圍內(nèi)。在許多病理情況下血沉明顯增快。紅細(xì)胞沉降是多種因素互相作用的結(jié)果。

[原理]血流中的紅細(xì)胞，因胞膜表面的唾液所具有的負(fù)電荷等因素而互相排斥使細(xì)胞間距離為約為25nm，故彼此分散懸浮而下沉緩慢。如血漿或紅細(xì)胞本身了生改變，則可使血沉了生變化。目前已知影響血沉增快或減慢的主要因素有：

1．血漿因素：在正常情況下，紅細(xì)胞膜表現(xiàn)的唾液酸帶有負(fù)電荷形成zeta電位，使紅細(xì)胞互相排斥而保持懸浮穩(wěn)定性，沉降很慢。但地病理情況下，血漿纖維蛋白原或球蛋白增多，致使紅細(xì)胞zeat電位降低，彼此易于沾邊成緡錢(qián)狀，此種聚集的紅細(xì)胞團(tuán)塊與血液接觸的總面積縮小，受到血漿的阻力減弱而使血沉加快，而白蛋白、糖蛋白等可使血沉減慢。此外血脂與血沉有關(guān)，膽固醇可使血沉加快，而卵磷脂可使血沉減慢。

2．紅細(xì)胞因素：正常情況下，紅細(xì)胞沉降力和血漿回流阻逆力大體平衡，血沉緩慢。如遇嚴(yán)重貧血，由于紅細(xì)胞減少總面積，承受血漿的阻逆力減小，因此血沉加恰似。反之，紅細(xì)胞增多癥的血沉減慢，紅細(xì)胞形狀對(duì)血沉也有一定影響，紅細(xì)胞直徑愈大，厚度愈小，血沉愈快。而球形紅細(xì)胞不易形成緡錢(qián)狀，所以血沉緩慢。

3．血沉管的位置：當(dāng)血沉管垂直而立時(shí)，紅細(xì)胞所受阻逆力最大。當(dāng)血沉管傾斜時(shí)，紅細(xì)胞多沿一側(cè)下降，而血漿在另一側(cè)上升，致使血沉加快。

[方法學(xué)評(píng)價(jià)]血沉測(cè)定的方法有多種，有魏氏法（Westergren法)、庫(kù)氏法（Coulter法、)、溫氏法（Wintobe-landsbrey法)、潘氏法。其差別在于抗凝劑、用血量、血沉管、觀察時(shí)間以及記錄結(jié)果方面不同。庫(kù)氏法每5分鐘記錄一海外僑胞結(jié)果，它除獲得1小時(shí)沉降結(jié)果外，還可以看到這段時(shí)間內(nèi)沉降曲線(xiàn)，對(duì)結(jié)核病灶活動(dòng)與否及預(yù)后判斷后有一定價(jià)值。Wintrobe –landsbery提出了貧血時(shí)血沉校正曲線(xiàn)，或消除貧血對(duì)血沉結(jié)果的影響。潘氏法不需從靜脈采血，僅須指端血即可，但常受組織液混入的影響。上述各方法均有其優(yōu)點(diǎn)、缺點(diǎn)，國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦魏氏法為標(biāo)準(zhǔn)法，并對(duì)器材和操作方法做出了嚴(yán)格的規(guī)定，國(guó)外已有一次性使用的塑料血沉管及其附件高品供應(yīng)，避免了乙肝病毒的交叉感染，同時(shí)還設(shè)計(jì)專(zhuān)用的自動(dòng)化儀器，自動(dòng)讀數(shù)并打印出結(jié)果。我國(guó)在1983年全國(guó)臨床檢驗(yàn)方法學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議上推薦魏氏法作為參考方法。

專(zhuān)用于血沉測(cè)定的儀器有兩種：一種是魏多法自動(dòng)血沉測(cè)定儀或尖似儀器自動(dòng)記錄后轉(zhuǎn)換成魏多法測(cè)定值；另一種是zeta紅細(xì)胞比值測(cè)定，前者其取血、抗凝、裝入血沉管等步驟均與常規(guī)操作相同，只是將聽(tīng)管垂直立于具有自動(dòng)計(jì)時(shí)裝置的血沉架之后，可于30，60，120分鐘時(shí)分別自動(dòng)記錄其結(jié)果。

1972年Bull發(fā)明了Zetafuhe離心機(jī)來(lái)測(cè)定 zeta紅細(xì)胞沉降率(ZSR)。將病人抗凝血注入特制血沉管中，置于特制的離心機(jī)內(nèi)，以400r/min正反方向旋轉(zhuǎn)，每次45秒鐘，旋轉(zhuǎn)4次共3min，在改變放置方向時(shí)的同時(shí)，能將沉降管自動(dòng)作180度旋轉(zhuǎn)，促使紅細(xì)胞密集分散4次，借紅細(xì)胞自身重力向下呈Z形下降，闈取zeta紅細(xì)胞比積值，然后再行高速離心沉淀最真實(shí)的紅細(xì)胞比積值，用HCT除以ZCT即得ZSR值，據(jù)報(bào)道其參考范圍為0.4747±0.0285,ZSR增大代表血沉增快。但該法尚未得到公認(rèn)。

ZSR測(cè)定的優(yōu)點(diǎn)有不受年齡、性別、朊貧血及閉幕式驗(yàn)條件的影響，篩選潛在性疾病的敏感性高，測(cè)定時(shí)間短等。

[參考值] 魏氏（Westergren) 法：成年男性0-15mm/h

成年女性0-20mm/h

潘氏法：成年男性0-10mm/h

成年女性0-12mm/h

[臨床意義]

1．血沉增快在臨床上更為常見(jiàn)，魏氏法不論男女其血沉值達(dá)25mm/h時(shí)，為輕度增快；達(dá)50mm/h時(shí)為中度增快；大于50mm/h 則為重度快。潘氏法不論男女血沉達(dá)20mm/h者均為增快。

（1)生理性增快：婦女月經(jīng)血沉略增快，可能與子宮內(nèi)膜破傷及出血有關(guān)，妊娠3年月以上血沉逐漸增快，可達(dá)30mm/h或更多，直到分娩后3周，如無(wú)關(guān)發(fā)癥則逐漸如無(wú)關(guān)發(fā)癥則逐漸恢復(fù)正常。其增快可能與生理性貧血、纖維蛋白原量逐漸增高、胎盤(pán)剝離、產(chǎn)傷等有關(guān)。60歲以上的高齡者因血漿纖維原蛋白量逐漸增高等，也常見(jiàn)血沉增快。

（2)病理性增快：①各種炎癥：細(xì)菌性急性炎癥時(shí)，血中急性反應(yīng)相物質(zhì)（acutephase reactant)迅速增多，包括α₁抗胰蛋白酶（α-antirypsin)、α₂巨蛋白（α₂-mactoglobulin)、C反應(yīng)蛋白（c reactive protein)、肝珠蛋白(haptoglobin )、運(yùn)鐵蛋白(transferrin)、纖維蛋白原(fibrinogen)等，主要因有釋放增多甚至制造加強(qiáng)所致。以上成分或爽或者少地均能促進(jìn)紅細(xì)胞的緡線(xiàn)狀聚集，故炎癥發(fā)生后2-3天即可見(jiàn)血沉增快。風(fēng)濕熱的病理改變結(jié)締組織性炎病癥，其活動(dòng)期血沉增快。慢性炎癥如結(jié)核病時(shí)，纖維蛋白原及免疫球蛋白含量增加，血沉蝗顯增快。臨床上最常用血沉來(lái)觀察結(jié)核病及風(fēng)濕熱有無(wú)活動(dòng)性及其動(dòng)態(tài)變化。②組織損傷及壞死：較大的手術(shù)創(chuàng)傷可導(dǎo)致血沉境快，如無(wú)合并癥，一般2-3周內(nèi)恢復(fù)正常。心肌梗塞時(shí)常于發(fā)病后3-4天血沉增快，并持續(xù)1-3周，心絞痛時(shí)血沉正常，故可借血沉結(jié)果加以鑒別；組織損傷壞死等引起血沉增快的機(jī)理大體同時(shí)。③惡性腫瘤：ESR加快可能與腫瘤細(xì)胞分泌糖蛋白（屬球蛋白)、腫瘤組織二壞死、繼發(fā)感染及惡液化氣質(zhì)貧血等因素有并。良性腫瘤血沉多正常，故常用血沉作為惡性腫瘤及一般X線(xiàn)檢查等所不能查見(jiàn)的惡性腫瘤。對(duì)于惡性腫瘤病人增快的血沉，可因手術(shù)切除或化療放療較徹底而漸趨正常，復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移時(shí)又見(jiàn)增快。④各種原因?qū)е碌母咔虻鞍籽�癥（hyperglobuinemia):亞急性感染性心內(nèi)膜炎、黑熱病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等所致的高球蛋白血癥時(shí)，血沉常明顯增快略種原因引起的相對(duì)性球蛋白增高如慢性腎炎、肝硬化時(shí)血沉亦常增快。多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥時(shí)，漿細(xì)胞的惡性增殖致使血漿病理性球蛋白高達(dá)40-100g/L或更高，故血沉增快。巨球蛋白癥病人，血漿中IgM 增多，其血沉理應(yīng)增快，但若IgM明顯增多而使血漿沾稠度增高即高沾綜合征時(shí)，反而抑制血沉，可得出一個(gè)正常甚至減慢的結(jié)果。⑤貧血：輕度貧血對(duì)血沉尚無(wú)影響，若血紅蛋白低于90g/L時(shí)，血沉可因而增快，貧血越嚴(yán)重，血沉增快越明顯，乃因紅細(xì)胞數(shù)量稀少，下沉?xí)r受到的磨擦阻力減少等所致。故明顯貧積壓病人作血沉檢查時(shí)應(yīng)進(jìn)行貧血因素的校正，而報(bào)告其校正后的結(jié)果。低色素性貧備量，因紅細(xì)胞體積減小，內(nèi)含血紅蛋白量不足而下沉緩慢；遺傳性球形細(xì)胞增多癥、鐮形細(xì)胞性貧時(shí)，由于其形態(tài)學(xué)的改變不利于緡錢(qián)狀聚集，故其血沉結(jié)果均常降低。⑥高膽固醇積壓癥：特別是動(dòng)脈粥樣硬化血膽固醇明顯增高者，血沉每見(jiàn)增快。

炎癥時(shí)白細(xì)胞計(jì)數(shù)與血沉結(jié)果起來(lái)分析對(duì)輔助診斷及療效觀察更不有益。白細(xì)胞的增高及其分類(lèi)變化直接受細(xì)菌素、組織分解產(chǎn)生等影響，故變化出現(xiàn)早，對(duì)急性炎癥的診斷、療效觀察更為重要，而血沉增快乃繼發(fā)于急性反應(yīng)時(shí)相產(chǎn)物的增多，特別是受纖維蛋白原和球蛋白增高等影響，相對(duì)來(lái)說(shuō)，出現(xiàn)較晚，故對(duì)觀察慢性炎癥特別是判斷療效更有價(jià)值。鑒于血沉增快大多因血漿中蛋白質(zhì)成分改變所引起，而這種改變一旦發(fā)生并不能迅速消除，因此復(fù)查血沉的間隔時(shí)間不宜太短，至少需一周。

2．血沉減慢意義較小，可因紅細(xì)胞數(shù)量明顯增多及纖維蛋白原含量嚴(yán)重減低所致見(jiàn)于各種原因所致的脫水血濃縮、真性紅細(xì)胞增多癥和彌漫性血管內(nèi)凝血等。

第二節(jié)　白細(xì)胞檢查

一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)

人體外周?chē)�血中的白�?xì)胞包括粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞。它們通過(guò)不同方式、不同機(jī)制消滅原體重，消除過(guò)敏原和參加免疫反應(yīng)，產(chǎn)生抗體等從而保證機(jī)體健康。中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞起源于共同的祖細(xì)胞，即多向骨髓祖細(xì)胞（pluripotential Myeloid progenitor,CFU-S).CFD-S既能增殖，又具不向不同細(xì)胞系分化的能力，平時(shí)處于靜止?fàn)顟B(tài)。這種細(xì)胞約占骨髓有核細(xì)胞數(shù)的0.5-1.0%，血循環(huán)中也可存在很少量。推測(cè)淋巴系祖CFD-S屬于同級(jí)的多向淋巴祖細(xì)胞，為T(mén)淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的共同祖細(xì)胞，存在于嘣髓內(nèi)。近年來(lái)對(duì)粒細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究有很大進(jìn)展，已知它起濤于骨髓中向粒系發(fā)展的祖細(xì)胞。后者有關(guān)體液因子（指集落刺激因子，也稱(chēng)粒細(xì)胞生成素)的調(diào)節(jié)下分化為原粒細(xì)胞，經(jīng)數(shù)次有絲分裂而依次發(fā)育國(guó)早幼粒、中幼粒及晚幼粒細(xì)胞，后者已喪失分裂能力，僅繼續(xù)發(fā)育為成熟的桿狀核和分葉核細(xì)胞。一個(gè)原粒細(xì)胞經(jīng)過(guò)增殖發(fā)育，最終生成8-32個(gè)分順核粒細(xì)胞。目前常根據(jù)其發(fā)育階段而將粒細(xì)胞群人為地劃分為分裂池（mitoticpool)、成熟池(matyration pool)、貯備池(storagepool)、循環(huán)池(circulatimg pool)等。了解粒細(xì)胞動(dòng)力學(xué)將有助于分析外周血中粒細(xì)胞增多，減少的原因。一般認(rèn)為從原粒細(xì)胞發(fā)育為分葉核細(xì)胞共需10天左右。這一過(guò)程是在骨髓內(nèi)進(jìn)行。貯備池中的桿狀核及分葉核粒細(xì)胞僅有約1/20釋放到周血中，大部分則仍存于貯備池內(nèi)以便不斷地補(bǔ)充損耗及應(yīng)急需。成熟細(xì)胞進(jìn)入積壓液后構(gòu)成況積壓液粒細(xì)胞池（total blood granulocyte pool,TBGP)該池中約半數(shù)的粒細(xì)胞游離運(yùn)行于血循環(huán)之中，構(gòu)成循環(huán)粒細(xì)胞池(circulating granulocyte pool,CGP)另一半則險(xiǎn)著于血管內(nèi)壁而形成邊緣粒細(xì)胞池(marginal granuulocyte pool,MGP)。白細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)所得的白細(xì)胞值僅為循環(huán)池的粒細(xì)胞數(shù)。邊緣池及循環(huán)池的粒細(xì)胞之間可以互相換位，并經(jīng)常保持著動(dòng)態(tài)平衡。由于許多因素的影響，這兩個(gè)池中的粒細(xì)胞可一過(guò)性地從一方轉(zhuǎn)向另一方面，從而導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果呈較大幅度甚至成倍的波動(dòng)。這一點(diǎn)在分析白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果時(shí)必須予考慮。進(jìn)入血液的粒細(xì)胞約平均停留10h之后，即逸出血管壁而進(jìn)入組織內(nèi)或者體腔中，以行使其防御功能。這些細(xì)胞一般不再返回血管，在組織中發(fā)揮功能作用的時(shí)間為1-2天，其后即消失。消亡的粒細(xì)胞由骨髓釋放的新生粒細(xì)胞加以補(bǔ)充，而保持外圍血中白細(xì)胞數(shù)量的相對(duì)恒定。

白細(xì)胞計(jì)數(shù)有目視計(jì)數(shù)法和儀器計(jì)數(shù)法，本節(jié)僅介紹目視法。

[原理]用白細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋液（多用稀乙酸溶液)，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞后，滴入慶數(shù)盤(pán)中，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算即可求得每升血液中各種白細(xì)胞的總數(shù)。

[方法學(xué)評(píng)價(jià)] 見(jiàn)第三章第三節(jié)。

[參考值] 成人：（4～10)×10⁹/L

初生兒：（15-20)×10⁹/L

6月-2歲：（11-12)×10⁹/L

[臨床意義] 見(jiàn)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)介紹。

二、白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)

雖人多種類(lèi)型白細(xì)胞分類(lèi)自動(dòng)化儀器相繼問(wèn)世，但不僅因價(jià)格昂貴限制其普及，而且其結(jié)果只起到篩選作用，迄今尚無(wú)一臺(tái)儀器能完全代替顯微鏡血涂片進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)檢查。因此，臨床上仍然采用傳統(tǒng)的顯微鏡分類(lèi)法。即將血液涂成薄膜，經(jīng)瑞特染色后，于顯微鏡下，按白細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征逐個(gè)分別計(jì)數(shù)，得出各種白細(xì)胞的比值或所占百分比。結(jié)合白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果，可間接求出每升血興高采烈中各種白細(xì)胞的絕對(duì)值。準(zhǔn)確的白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)（differential count,CD)結(jié)果，來(lái)源于扎實(shí)的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)和質(zhì)量?jī)?yōu)良的血yin片制作與染色，這也是質(zhì)量控制的關(guān)鍵。外周血正常白細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)請(qǐng)參考實(shí)習(xí)手冊(cè)。血yin片的制作與染色本書(shū)第一章。本節(jié)僅闡述各類(lèi)白細(xì)胞病理變化的臨床意義。

[參考值] （成人)

白細(xì)胞分類(lèi) 百分比 絕對(duì)值

中性桿狀核粒細(xì)胞0.01～0.05 (0.04～0.5)×10⁹/L

中性分順核粒細(xì)胞 0.5～0.7 (2～7)×10⁹/L

嗜酸性粒細(xì)胞 0.005～0.05 (0.02～0.5)×10⁹/L

嗜堿性粒細(xì)胞 0～0.01 (0～1)×10⁹/L

淋巴細(xì)胞 0.20～0.4 (0.8～4)×10⁹/L

單核細(xì)胞 0.03～0.08 (0.12～0.8 )×10⁹/L

[臨床意義]

（一)中性粒細(xì)胞

由于中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的50-70%，其增高和減低直接影響白細(xì)胞總數(shù)的變化。因此在臨床檢查中絕大多數(shù)病例白細(xì)胞總數(shù)實(shí)際反映著中性粒細(xì)胞變化，所以本節(jié)介紹的白細(xì)胞總數(shù)的臨床意義的主要指中性粒細(xì)胞的變化。

1．中性粒細(xì)胞數(shù)時(shí)量變化

（1)中性粒細(xì)胞生理性增多：

1)年齡：初生兒白細(xì)胞較高，一般在15×10⁹/L左右，個(gè)別可高達(dá)30×10⁹/L以上。通常在3-4天后降至10×10⁹/L左右，約保持3個(gè)月，然后逐漸降低至成人水平。初生兒外周血白細(xì)胞主要為中性粒細(xì)胞。到第6-9天逐漸下降至與淋巴細(xì)胞大致相等，以后淋巴細(xì)胞逐漸增多，整個(gè)嬰兒其淋巴細(xì)胞數(shù)均較高，可達(dá)70%。到2-3風(fēng)后，淋巴細(xì)胞逐漸下降，中性粒細(xì)胞逐漸下升，到4-5歲二者又基本相等，形成中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞變化曲線(xiàn)的兩次交叉，至青春其時(shí)與成人基本相同，白細(xì)胞生下變化曲線(xiàn)見(jiàn)圖2-5。

圖2-5 白細(xì)胞變化曲線(xiàn)

2)。日間變化：在靜息狀態(tài)時(shí)白細(xì)胞數(shù)較低，活動(dòng)和進(jìn)食后較高；早晟較低，下午較高；一日之間最高值與最低值之間可相差一倍。運(yùn)動(dòng)、疼痛和情緒變化，一般的體力勞動(dòng)、冷熱水浴、日光或紫外線(xiàn)照射等均可使白細(xì)胞輕度增多。如劇烈運(yùn)動(dòng)、可于短時(shí)間內(nèi)使白細(xì)胞高達(dá)35×10⁹/L，以中性粒細(xì)胞為主，當(dāng)運(yùn)動(dòng)結(jié)束后迅速即恢復(fù)原有水平。這種短暫的變化，主要是由于循環(huán)池和緣籽的粒細(xì)胞重新分配所致。

3)妊娠與分娩：妊娠其白細(xì)胞常見(jiàn)增多，特別是最后一個(gè)月，常波協(xié)于（12～17)×10⁹/L之間，分娩時(shí)可高達(dá)34×10⁹/L。分娩后2-5日內(nèi)恢復(fù)正常。由于白細(xì)胞的生理波動(dòng)很大，只有通過(guò)定時(shí)和反復(fù)觀察才有意義。

（2)中性粒細(xì)胞病理性增多：

1)急性感染：急性化膿性感染時(shí)，中性粒細(xì)胞增高程度取決于感染微生物的種類(lèi)、感染灶的范圍、感染的嚴(yán)重程度、患者的反應(yīng)能力。如感染很局限且輕微，白細(xì)胞總數(shù)仍可正常，但分類(lèi)檢查時(shí)可見(jiàn)分葉核百公率有所增高；中度感染時(shí)，白細(xì)胞總數(shù)增高大于10×10⁹/L，并伴有輕度核象左移；嚴(yán)重感染時(shí)總數(shù)常明顯增高，可達(dá)20×10⁹/L以上，且伴有明顯核象左移。

2)嚴(yán)重的損傷或大量血細(xì)胞破壞：在較大手術(shù)后12～36h，白細(xì)胞常達(dá)10×10⁹/L以上，其增多的細(xì)胞成分以中性分葉核粒細(xì)胞為主。急性心肌硬死后1-2天內(nèi)，常見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)明顯增高，借此可與心絞痛相區(qū)別。急性溶血反應(yīng)時(shí)，也可見(jiàn)白細(xì)胞增多，這些可能與心肌損傷和手術(shù)創(chuàng)傷等所產(chǎn)生的蛋白分解產(chǎn)生及急性溶血所導(dǎo)致的相對(duì)缺氧等，促進(jìn)骨髓貯備池增加釋放有關(guān)。

3)急性大出血：在脾破裂或?qū)m外孕輸卵管破裂后，白細(xì)胞迅速增高，常達(dá)（20～30)×10⁹/L。其增多的細(xì)胞也要是中性分葉核粒細(xì)胞。這可能與應(yīng)激狀態(tài)、內(nèi)出血而一過(guò)性缺氧等有關(guān)。

4)急性中毒：化學(xué)藥物如安眠藥、敵敵畏等中毒時(shí)，常見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)增高，甚至可達(dá)20×10⁹/L或更高。代謝性中毒如糖尿病酮癥酸中毒及慢性腎炎尿毒癥時(shí)，也常見(jiàn)白細(xì)胞增多，均以中性分葉核粒細(xì)胞為主。

5)腫瘤性增多：白細(xì)胞呈長(zhǎng)期持續(xù)性增多，最常見(jiàn)于粒細(xì)胞性白血病，其次也可見(jiàn)于各種惡性腫瘤的晚期，此時(shí)不但總數(shù)常達(dá)（10～20)×10⁹/L或更多，且可有較明顯的核象左移現(xiàn)象，而呈所謂類(lèi)白血病反應(yīng)。白血病時(shí)白細(xì)胞總數(shù)增高的主要機(jī)制為白血病細(xì)胞失控地?zé)o限增值；白血病細(xì)胞的周期延長(zhǎng)；血中轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)（正常白細(xì)胞約為10h，白血病細(xì)胞平均為33～38h)。惡性腫瘤時(shí)白細(xì)胞增多的機(jī)理為某些惡性腫瘤如肝癌、胃癌等產(chǎn)生促粒細(xì)胞生成素；惡性腫瘤壞死分解產(chǎn)物促進(jìn)內(nèi)骨髓貯備池釋放；惡性腫瘤伴有骨髓轉(zhuǎn)移而將骨髓內(nèi)粒細(xì)胞（甚至較幼稚的粒的細(xì)胞，并可伴有幼紅細(xì)胞)排擠釋放入血。

（3)中性粒細(xì)胞減少（neutropenia)：

1)。某些感染：某些革蘭多陰性桿菌如傷寒、副傷寒桿菌感染時(shí)，如無(wú)并發(fā)癥，白細(xì)胞當(dāng)選均減少，甚至可低到2×10⁹/L以下，一些病毒感染如流感時(shí)的白細(xì)胞亦減少，可能是由于在細(xì)菌素及病毒作用下使貼壁的即邊緣池粒細(xì)胞增多而導(dǎo)致循環(huán)池中粒細(xì)胞減少所致，也可能與內(nèi)毒素抑制骨髓釋放粒細(xì)胞有關(guān)。

2)某些血液�。喝绲湫偷脑偕�障礙性貧血時(shí)，呈“三少”表現(xiàn)。此時(shí)白細(xì)胞可少到1×10⁹/L以下，分類(lèi)時(shí)幾乎無(wú)均為淋巴細(xì)胞，乃因中性細(xì)胞嚴(yán)重減少所致的淋巴細(xì)胞相對(duì)增多。小部分急性白血病其白細(xì)胞總數(shù)不高反而減低，稱(chēng)非白血性白血�。╝leukemic leukemia)，其白細(xì)胞可<1×10⁹/L，分類(lèi)時(shí)亦呈淋巴細(xì)胞相對(duì)增多，此時(shí)只有骨髓檢查才能明確診斷。

3)慢性理、化損傷：電離輻射（如X線(xiàn)等)、長(zhǎng)期服用氯霉素后，可因抑制骨髓細(xì)胞的有絲分裂而致白細(xì)胞減少，故于接觸和應(yīng)用期間每周應(yīng)作一次白細(xì)胞計(jì)數(shù)。

4)自笛免疫性疾�。喝�系統(tǒng)性紅斑狼瘡等，由于自身免疫性抗核體導(dǎo)致白細(xì)胞破而減少。

5)脾功能亢進(jìn)：各種原因所致的脾腫大，如門(mén)脈性肝硬化、班替綜合征等均可見(jiàn)白細(xì)胞減少。其機(jī)制為腫大的脾中的單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)破壞了過(guò)多的白細(xì)胞；腫大脾分泌了過(guò)多的脾素，而此種體液因子能滅活促進(jìn)粒細(xì)胞生成的某些因素。

2．中性粒細(xì)胞的核象變化

（1)核象左移：外周血中桿狀核細(xì)胞增多世界形勢(shì)并出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細(xì)胞時(shí)均稱(chēng)為核象左移。最常見(jiàn)于各種病原體所致的感染，特別是急性化膿性細(xì)菌感染時(shí)，核象左移時(shí)常伴有明顯的中毒顆粒、空泡變性、核變性等質(zhì)的改變。急性中毒、急性溶血時(shí)民右見(jiàn)到核象左移。從中性粒細(xì)胞動(dòng)力學(xué)來(lái)看嚴(yán)重的核象左移時(shí)，不但用了骨髓貯備池、成熟池的細(xì)胞，甚至也涉及了分裂池的成分。

（2)核象右移：正常人外周血的中性粒細(xì)胞以3葉核者為主，若5葉以上者超過(guò)3%則稱(chēng)為核象右移，此時(shí)常伴有白細(xì)胞總數(shù)減少。可由于缺乏造血物質(zhì)、脫氧核糖核酸減少或骨髓造血功能減肥所致主要見(jiàn)于營(yíng)養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血、也可見(jiàn)于應(yīng)用抗代謝藥的如阿糖胞苷或6-巰基嘌呤等之后。在炎癥的恢復(fù)期，一過(guò)性地出現(xiàn)核象右移是正常現(xiàn)象，如在疾病進(jìn)行期突然出現(xiàn)核右移的變化，則表不預(yù)后不良。圖2-6顯示了中性粒細(xì)胞的核象變化。

圖2-6 中性粒細(xì)胞的核象變化

3．中性粒細(xì)胞形態(tài)變化

（1)中性粒細(xì)胞的毒性變化：

1)中毒顆粒：比正常中性顆粒粗大，大小不等，分布不均勻，染色較深，呈黑色或紫黑色。有時(shí)顆粒很粗大，與嗜堿粒細(xì)胞易混淆；有時(shí)雙小而稀少，散雜在正常中性顆粒之中。

含中毒顆粒的中性粒細(xì)胞應(yīng)與嗜堿粒細(xì)胞區(qū)別，其要點(diǎn)：嗜堿粒細(xì)胞核較少分葉、染色較淺、顆粒較大、大小不均、著色更深、細(xì)胞邊級(jí)處常分布較多，可分布于核上，胞漿中常見(jiàn)小空泡。在血片染色偏堿或染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí)，易將中性顆粒誤認(rèn)為中毒顆粒。但只要注意全片各種細(xì)胞的染色情況，則不難區(qū)別。

含中毒顆粒細(xì)胞在中性細(xì)胞中所占比值稱(chēng)為毒性指數(shù)。毒性指數(shù)愈大，提示中毒變性結(jié)果。

2)空泡：可為單個(gè)，但常為多個(gè)。大小不等，亦可在核中出現(xiàn)。被認(rèn)為是細(xì)胞脂肪變性的結(jié)果。

3)Dohle體：是中性粒細(xì)胞胞因毒性變而保留的嗜堿性區(qū)域。呈圓形、梨形或云霧狀。界限不清，染成灰藍(lán)色，直徑為1-2μm，是胞質(zhì)局部吵成熟，即核與胞質(zhì)發(fā)育不平衡的表現(xiàn)。Dohle小體亦可見(jiàn)于單核細(xì)胞中，其意義相同。

4)退行性變：常見(jiàn)者有胞體腫大、結(jié)構(gòu)模糊、邊緣不清晰、核固縮、核腫脹和核溶解（染色質(zhì)模糊、疏松)等等。如胞質(zhì)破裂后消失，只剩胞膜，則成裸核或藍(lán)狀細(xì)胞，通行性變亦可見(jiàn)于衰老細(xì)胞銷(xiāo)售量在正常情況下為數(shù)極少。

上術(shù)這形態(tài)變化見(jiàn)彩圖2。這些毒性變化可單獨(dú)出現(xiàn)，亦可同時(shí)出現(xiàn)。觀察中性粒細(xì)胞的毒性的變化，對(duì)估計(jì)疾病的預(yù)后有一定幫助。

（2)其它異常白細(xì)胞：

1)巨多核中性粒細(xì)胞：成熟中性細(xì)胞胞體增大，核分葉過(guò)多，常為5-9葉，甚至12-15葉。各葉大小差別很大，常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血。

2)Pelger-Huet畸形：表現(xiàn)為成熟中性粒細(xì)胞核分葉能力減肥。常為桿狀和分兩葉（其間難成細(xì)絲)。呈腎形或啞鈴形。染色質(zhì)聚集成小塊或條索網(wǎng)狀，其間有空折間隙。為常染色體顯性遺傳異常，一般無(wú)臨床癥狀。但也可繼發(fā)于革些嚴(yán)懲感染、白血病、骨髓增生異常綜合征、腫瘤轉(zhuǎn)移和某些藥物（如水仙胺、磺基二甲基異惡唑)治療后。

3)Chediak-Higashi畸形：在Chediak-Higashi綜合征患者骨髓和血液各期粒細(xì)胞中，含數(shù)個(gè)至數(shù)十個(gè)直徑2-5μm的包涵體，即異常巨大的紫藍(lán)或紫紅色顆粒。電鏡觀察和細(xì)胞化學(xué)顯示，巨大顆粒為異常溶酶體。患者容易感染，常伴白化病。為常染色體陷性遺傳，此異常顆也偶見(jiàn)于單核細(xì)胞、淋糾細(xì)胞中。

4)Alder-Reilly畸形：其特點(diǎn)是在中性粒細(xì)胞中含巨大深雜的嗜天青顆粒，染深紫色。此異常顆粒與中毒顆粒的區(qū)別是顆粒較大，不伴有白細(xì)胞數(shù)增高、核象左移和空泡等其它毒性變化。患者常伴有脂肪軟骨營(yíng)養(yǎng)不良或的遺傳性粘多糖代謝障礙。類(lèi)似顆粒亦可見(jiàn)于其它白細(xì)胞中。

5)May-Hegglin畸形：患者粒細(xì)胞終身含有淡藍(lán)色涵體。實(shí)驗(yàn)證明這種包涵體與前述常見(jiàn)于嚴(yán)重感染、中毒等所見(jiàn)Dohle體相同，但常較大而圓。除中性粒細(xì)胞外，其他粒細(xì)胞甚至巨核細(xì)胞內(nèi)亦可見(jiàn)到。

各種白細(xì)胞形態(tài)見(jiàn)彩圖2。

（二)嗜酸性粒細(xì)胞

見(jiàn)本節(jié)“嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)”。

（三)嗜堿性粒細(xì)胞

見(jiàn)本節(jié)“嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)”。

（四)淋巴細(xì)胞

1．淋巴細(xì)胞數(shù)量變化

（1)淋巴細(xì)胞增多（lymphocytosis):

1)某些病毒或細(xì)菌所致的急性傳染病，如風(fēng)疹、流行性腮腺炎，傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、傳染性單核細(xì)胞增多癥等。百日咳時(shí)淋巴細(xì)胞常明顯增多。

2)某些慢性感染：如結(jié)核病時(shí)淋巴細(xì)胞也增多，但白細(xì)胞總數(shù)一般仍在正常范圍內(nèi)，須借助白細(xì)胞分類(lèi)來(lái)識(shí)別。

3)腎移植術(shù)后：如發(fā)生排異反應(yīng)時(shí)，于排異前期，淋巴細(xì)胞的絕對(duì)值即增高。

4)淋巴細(xì)胞性白血病、白血性淋巴肉瘤；前者如系慢性型，以白血病性成熟淋巴細(xì)胞為主，如系急性型則以原幼淋巴細(xì)胞為主，均可致白細(xì)胞總數(shù)增高；后者多以原、幼淋巴細(xì)胞為主。

5)再生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥，由于中性粒細(xì)胞顯著減少，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞百分率相對(duì)增高，稱(chēng)為淋巴細(xì)胞相對(duì)增多，此時(shí)白細(xì)胞總數(shù)是減低的。

（2)淋巴細(xì)胞減少（lymphopenia):主要見(jiàn)于接觸放射線(xiàn)及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上遙皮質(zhì)激素時(shí)，要嚴(yán)重化膿性感染時(shí)，由于中性粒細(xì)胞顯著增加，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞百分率減低，但計(jì)算其絕對(duì)值，淋巴細(xì)胞數(shù)量仍在正常范圍。

2．淋巴細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化

（1)異型淋巴細(xì)胞：在傳染性單核增多癥、病毒性肺肝炎、流行性出血熱等病毒感染或過(guò)敏原則刺激下，可使淋巴細(xì)胞增生，并出現(xiàn)某些形態(tài)學(xué)變化，稱(chēng)為異型淋巴細(xì)胞。Downey將其按形態(tài)特征分為三型：

1型（空泡型)：最多見(jiàn)。胞體比正常淋巴細(xì)胞稍大，多為圓形、橢圓形或不規(guī)則形。核圓形、腎形或分葉狀、常偏位。染色質(zhì)粗糙，呈粗網(wǎng)狀或小塊狀，排列不規(guī)則。胞質(zhì)豐富，染深藍(lán)色，含空泡或呈泡沫狀。

Ⅱ型（幼稚型)：胞體較大，核圓形或卵圓形。染色質(zhì)細(xì)致呈網(wǎng)狀排列，可見(jiàn)1-2個(gè)至發(fā)生母細(xì)胞化的結(jié)果。

Ⅲ型（不規(guī)則型)：胞體較大，外形常不規(guī)則，可有多數(shù)足。核形狀及結(jié)構(gòu)與1型相同或更不殊途同歸，染色質(zhì)較粗糙致密。胞質(zhì)量豐富，染色淡藍(lán)或灰藍(lán)色，有透明感，邊緣處著色較深藍(lán)色�？捎猩贁�(shù)空泡。

（2)受放射線(xiàn)損傷后淋巴細(xì)胞形態(tài)變化：通過(guò)放射生物學(xué)的研究以及對(duì)射線(xiàn)損傷病人觀察，證實(shí)淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞中對(duì)電離輻射最敏感的細(xì)胞。人體遭受較小劑量的電離輻射之后，雖未出現(xiàn)明顯臨床癥狀，但血中淋巴細(xì)胞的數(shù)量卻已顯著減少。若經(jīng)較大劑量照射后，淋巴細(xì)胞迅速減少，劑量越大，減少得越嚴(yán)重以致衷竭，與此同時(shí)受損傷的淋巴細(xì)胞還出現(xiàn)形態(tài)學(xué)改變，如核固縮、核破壞、雙核的淋巴細(xì)胞以及含有衛(wèi)星核的淋巴細(xì)胞。后者是指胞質(zhì)中主核之旁出現(xiàn)小核也稱(chēng)微核，是射線(xiàn)損傷后較為特殊的甩所見(jiàn)。

（3)淋巴細(xì)胞性白血病時(shí)形態(tài)學(xué)變化：在急、慢性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)，不但出現(xiàn)各階段的原幼細(xì)胞，且處于各分階段的白血病的細(xì)胞都有特殊的形態(tài)變化。在《血液學(xué)及血液學(xué)檢驗(yàn)》的章節(jié)中將予以闡述。

（五)單核細(xì)胞

單核細(xì)胞變化見(jiàn)本節(jié)“單核細(xì)胞計(jì)數(shù)”。

三、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)

嗜酸性粒細(xì)胞起源于骨髓內(nèi)CFU-s。經(jīng)過(guò)單向嗜酸性祖細(xì)胞（CFU-EO)階段，在有關(guān)生成素誘導(dǎo)下逐步分化，成熟為嗜酸性粒細(xì)胞，在正常人外周血中少見(jiàn)，僅為0.5-5%。

嗜酸性粒細(xì)胞有微弱的吞噬作用，但基本是無(wú)殺菌力，它的主要作用是抑制嗜石破天驚生粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞合成與釋放其活性物質(zhì)，吞噬其釋出顆粒，并分泌組胺酶發(fā)破壞組胺，從而起到限制過(guò)敏反應(yīng)的作用。此外，實(shí)驗(yàn)癥明它還參加與對(duì)嚅蟲(chóng)的免疫反應(yīng)。嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子至少有六大來(lái)源：①?gòu)姆蚀蠹?xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞而來(lái)的組胺（histamine)；②由補(bǔ)體而來(lái)的C_3A/C_5A、C_567,其中以C_5a最為重要；③從致敏淋巴細(xì)胞而來(lái)的嗜酸性細(xì)胞趨化因子；④從寄生蟲(chóng)而來(lái)的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子；⑤從某些細(xì)菌而的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子（如乙型溶血性鏈球菌等)；⑥從腫瘤細(xì)胞而來(lái)的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子。以上務(wù)因素均可引起的嗜酸性粒細(xì)胞增多。由于嗜酸性粒細(xì)胞在外周血中百分率很低，故經(jīng)白細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞百分率換算而來(lái)的絕對(duì)值誤差較大，因此，在臨床上需在了解嗜酸性粒細(xì)胞的變化時(shí)，應(yīng)采用直接計(jì)數(shù)法。

[原理]用嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，同時(shí)破壞紅細(xì)胞和大部分其它白細(xì)胞，并將嗜酸性粒細(xì)胞著色，然后滴入細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)中，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)，即可求得每升血液中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)。嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液中類(lèi)繁多，雖想方不同，但作用大同小異。分為保護(hù)嗜酸性粒細(xì)胞而破壞其它細(xì)胞的物質(zhì)和著染嗜酸性粒細(xì)胞的物質(zhì)（如溴甲酚紫、伊紅、石楠紅等)，可根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的條件選擇配制。

[參考值] （0.05-0.5)×10⁹/L

[臨床意義]

1．生理變化：在勞動(dòng)、寒冷、饑鋨、精神刺激等情況下，交感神經(jīng)興奮，通過(guò)下視丘刺激垂體前葉，產(chǎn)生促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH)使腎上腺皮質(zhì)產(chǎn)生腎上腺皮質(zhì)激素。腎上腺皮質(zhì)激素可阻止骨髓釋放嗜酸性粒細(xì)胞，并促使血中嗜酸性粒細(xì)胞向組織浸潤(rùn)，從而導(dǎo)致外周血中嗜酸性粒細(xì)胞減少。因此正常人嗜酸性粒細(xì)胞白天較低，夜間較高。上午波動(dòng)較大，下午比較恒定。

2．嗜酸性粒細(xì)胞增多（eosinophilia)

(1)過(guò)敏性疾患：如在支氣管哮喘、血管神經(jīng)性水腫、食物過(guò)敏、血精病時(shí)均可見(jiàn)血中嗜酸性粒細(xì)胞增多。腸寄生蟲(chóng)抗原與腸壁內(nèi)結(jié)合IgE的肥大細(xì)胞接觸時(shí)，使后者脫顆粒而稀放組胺，導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞增多。在某些鉤蟲(chóng)病患者，其血中嗜酸性粒細(xì)胞明顯增多南昌周到白細(xì)胞總數(shù)高達(dá)數(shù)萬(wàn)分類(lèi)中90%以上為嗜酸性粒細(xì)胞，而呈嗜酸性粒細(xì)胞型類(lèi)白血病反應(yīng)，但其嗜酸性粒細(xì)胞均屬成熟型，隨驅(qū)蟲(chóng)徹底及感染消除而血象逐漸恢復(fù)正常。

（2)某些傳染�。阂话慵毙詡魅静�時(shí)，血中嗜酸性粒細(xì)胞均減少，唯猩紅熱時(shí)反而增高，現(xiàn)已知這可能因該病病原菌（乙型溶血性鏈球菌)所產(chǎn)生的酶能活公補(bǔ)體成分，繼而引起嗜酸性粒細(xì)胞增多所致。

（3)慢性粒細(xì)胞性白血病：此時(shí)嗜酸性粒細(xì)胞�？筛哌_(dá)10%以上，并可見(jiàn)有幼稚型。罕見(jiàn)的嗜酸性粒細(xì)胞性白血病時(shí)其白血病性嗜酸粒細(xì)胞可達(dá)90%以上，以幼稚型居多，且其嗜性顆粒大小不均，著色不一，分布紊亂，并風(fēng)氣見(jiàn)空泡等形態(tài)學(xué)改變。某些惡性腫瘤，特別是淋巴系統(tǒng)惡性疾病。如堆霍奇金病及某些上皮系腫瘤如肺癌時(shí)，均可見(jiàn)嗜酸性粒細(xì)胞增多，一般在10%左右。

3．嗜酸性粒細(xì)胞減少（eosinopenia)見(jiàn)于傷寒、副傷寒、手術(shù)后嚴(yán)重組織損傷以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺此質(zhì)激素后。

4．嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的其他應(yīng)用

（1)觀察急生傳染病的預(yù)后：腎上腺皮質(zhì)有促進(jìn)體抗感染的能力，因此當(dāng)急性感染（如傷寒)時(shí)，腎上腺皮質(zhì)激素分泌增加，嗜酸性粒細(xì)胞不減少，恢復(fù)期嗜酸性粒細(xì)胞又逐漸增多。若臨床癥狀嚴(yán)重，而嗜酸性粒細(xì)胞不減少，說(shuō)明腎上腺皮質(zhì)功能衰竭；如嗜酸性粒細(xì)胞持續(xù)下降，甚至完全消失，說(shuō)明病情嚴(yán)懲反之，嗜酸性粒細(xì)胞重新出現(xiàn)，甚至?xí)簳r(shí)增多，則為恢復(fù)的表現(xiàn)。

（2)觀察手術(shù)和燒傷病人的預(yù)后：手術(shù)后4h嗜酸性細(xì)胞顯著減少，甚至消失，24-48h后逐漸增多，增多速度與病情變化基本一致大面積澆傷病人，數(shù)小時(shí)后嗜酸性粒細(xì)胞完全消失，且持續(xù)時(shí)間較穆斯林，若大手術(shù)或面積燒傷后，病人嗜酸性粒細(xì)胞不下降或下降很少，均表明預(yù)后不良。

（3)測(cè)定腎上腺皮同功能：ACTH可使腎不腺破質(zhì)產(chǎn)生腎上腺皮質(zhì)激素，造成嗜酸性粒細(xì)胞減少。嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后，隨即肌注或靜脈滴注ACTH25mg，直接刺激腎上腺皮質(zhì)，或注射0.1%腎上腺素0.5ml，刺激垂體前葉分泌ACTH，間接刺激腎上腺皮質(zhì)。肌注后4h或靜脈滴注開(kāi)始后8h，再用嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)。結(jié)果判斷：①在正常情況下，注射ACTH或涌上腺素后，嗜酸性粒細(xì)胞比注射前應(yīng)減少50%以上；②腎上腺皮質(zhì)功能正常，而垂體前葉功能不良者，則直接刺激時(shí)下降50%以上，間接刺激時(shí)不下降或下降很少；③垂體功能亢進(jìn)時(shí)，直接和間接刺激均可下降80-100%；④垂體前葉功能正常，而腎上腺皮質(zhì)功能不良者則直接間接刺激下降均不到50%。艾迪生（Addison)病，一般下降不到20%，平均僅下降4%。

四、嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)

嗜堿性粒細(xì)胞胞質(zhì)中含有大小不等的嗜堿性顆粒，這些顆粒中含有豐富的組按、肝素，后者可以抗血凝和使血脂分散，而組按則可改變毛細(xì)血管的通透性，它反應(yīng)快而作用時(shí)間短，故又稱(chēng)快反應(yīng)物質(zhì)。顆粒中還含有緩慢作用物質(zhì)，它可以改變血管和通透性，并使平滑肌收縮，特別是使支氣管的平滑肌收縮而引起的哮喘。近年來(lái)已證實(shí)嗜堿性粒細(xì)胞參與特殊的免疫反應(yīng)，即第三者型變態(tài)反應(yīng)。

[方法學(xué)評(píng)價(jià)] 嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)量很少，通常僅占白細(xì)胞的1/200～1/300。在一般白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)中很難見(jiàn)到。自1953年Moore首次報(bào)告直接計(jì)數(shù)法以后對(duì)嗜堿性粒細(xì)胞在外周血變化的臨床意義才逐漸了解。目前常用方法有兩種。即甲苯胺痔支（Cooper法)和中性紅法（shelley法)。

此二種方法操作步驟完全相同，即分別用甲苯胺蘭稀釋液或中性紅稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，同時(shí)破壞紅細(xì)胞并使嗜堿性細(xì)胞分別染成紫紅色或紅色。然后滴入細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)，即可直接求得每升血液中嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)。

[參考值] （0.02～0.05)×10⁹/L

[臨床意義]

1．增多：常見(jiàn)于慢性粒細(xì)胞性白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、粘液星水腫、潰瘍性結(jié)腸炎、變態(tài)反應(yīng)、甲狀腺功能減退等。

2．減少：見(jiàn)于速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（蕁麻疹、過(guò)敏性休克等)、促腎上腺皮質(zhì)激素及糖皮質(zhì)激素過(guò)量、應(yīng)激反應(yīng)（心肌梗死、嚴(yán)重感染、出血等)、甲狀腺功能亢進(jìn)癥、庫(kù)欣綜合癥等。

在臨床上嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，常用于慢性粒細(xì)胞白血病與類(lèi)白血病反應(yīng)的鑒別和觀察變態(tài)反應(yīng)。

五、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)

單核細(xì)胞（moncyte)占白細(xì)胞總數(shù)的3-8%，骨髓多能造血干細(xì)胞分化為髓系干細(xì)胞和粒-單系祖細(xì)胞之后進(jìn)而發(fā)育為原單核細(xì)胞、幼單核細(xì)胞及單核細(xì)胞，后者逐遂可釋放至外周血中。循環(huán)血內(nèi)的單核細(xì)胞并非終末細(xì)胞，它在血中的停留只是暫的，3-6天后進(jìn)入組織或體腔內(nèi)，可轉(zhuǎn)變?yōu)橛资杉?xì)胞，再成熟為巨細(xì)胞。因此單核細(xì)胞與組織中的巨噬細(xì)胞構(gòu)成單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，而發(fā)揮防御功能。

[原理]單核細(xì)胞具有強(qiáng)烈的非特異性酯酶活性，在酸性條件下，可將稀釋液中α-醋酸萘酯水解，產(chǎn)生α-萘酚，并與六偶氮會(huì)品紅結(jié)合成穩(wěn)定的紅煞費(fèi)苦心化合物，沉積于單核細(xì)胞內(nèi)，可與其他白細(xì)胞區(qū)別。因此將血液稀釋一業(yè)倍數(shù)，然后滴入計(jì)數(shù)盤(pán)，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)單核細(xì)胞數(shù)，即可直接求得每升血液中單核細(xì)胞數(shù)。

[參考值] （0.196±0.129)×10⁹/L

[臨床意義]

1．單核細(xì)胞增多（monocytosis)

(1)生理性增多：正常兒童外周血中的單核細(xì)胞較成人稍多，平均為9%，出生后2周的嬰兒可呈生理性單核細(xì)胞增多，可達(dá)15%或更多。

（2)病理性增多：?jiǎn)魏?巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的防御作用是通進(jìn)以下3個(gè)環(huán)節(jié)來(lái)完成的：①對(duì)某些病原體如EB病毒、結(jié)核桿菌、麻風(fēng)桿菌、沙門(mén)菌、布魯勞動(dòng)保護(hù)菌、瘧原蟲(chóng)和弓形體等，均有吞噬和殺滅的作用；②能清除損傷或已死亡的細(xì)胞，在炎癥組織中迅速出現(xiàn)多數(shù)中性粒細(xì)胞與單核細(xì)胞，前三天中性粒細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)，以后或更晚則以單核細(xì)胞為主，由于單核細(xì)胞和巨噬吞噬殘余的細(xì)菌和已亡的粒的細(xì)胞，使炎癥得以?xún)艋�；③處理抗原，在免疫反�?yīng)的某些階段協(xié)助淋巴細(xì)胞發(fā)揮其免疫作用等。

臨床上單核細(xì)胞增多常見(jiàn)于：

1)某些感染：如亞急生感染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病等；急性感染的恢復(fù)期刀可見(jiàn)單核細(xì)胞增多；在活動(dòng)性肺結(jié)核如嚴(yán)重的浸潤(rùn)性的杰粒性結(jié)核時(shí)，可致血中單核細(xì)胞明顯增多，甚至呈單核細(xì)胞類(lèi)白血病反應(yīng)，白細(xì)胞占總數(shù)常達(dá)20×10⁹/L以上，分類(lèi)時(shí)單核細(xì)胞可達(dá)30%以上，以成熟型為主，但亦可見(jiàn)少數(shù)連續(xù)劇單核細(xì)胞。

2)某些血液�。毫＜�(xì)胞缺乏癥的恢復(fù)期，常見(jiàn)單核細(xì)胞一過(guò)性增多，惡性組織細(xì)胞病、淋巴瘤時(shí)可見(jiàn)幼單核細(xì)胞增多，成熟型亦見(jiàn)增多。骨髓增生異常綜合征時(shí)除貧血，白細(xì)胞減少等之外。白細(xì)胞分類(lèi)時(shí)常見(jiàn)核細(xì)胞增多。

2．單核細(xì)胞減少，意義不大從略。

六、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)

成人淋巴細(xì)胞約占白細(xì)胞的1/4，為人體主要免疫活性細(xì)胞。淋巴細(xì)胞同樣豐收源于多能干細(xì)胞，在骨髓、脾、淋巴結(jié)和其它淋巴組織生成中驚訝發(fā)育成熟者稱(chēng)為B淋巴細(xì)胞，在積壓液中占淋巴細(xì)胞的20-30%。B細(xì)胞壽命較短，一般僅3-5天，經(jīng)抗原激素活后分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生特異性抗體，參與體液免疫。在胸腺、脾、淋巴結(jié)和其他組織，依賴(lài)胸腺素發(fā)育成熟者稱(chēng)為T(mén)淋巴細(xì)胞，在血液中占淋巴細(xì)胞的60-70%。壽命較長(zhǎng)，可達(dá)數(shù)月，甚至數(shù)年。T細(xì)胞被抗原體致敏后，可產(chǎn)生多種免疫活性物質(zhì)，參與細(xì)胞免疫。此外還有少數(shù)NK細(xì)胞、（殺傷細(xì)胞)、N細(xì)胞（裸細(xì)胞)、D細(xì)胞雙標(biāo)志細(xì)胞。但在普通光學(xué)顯微鏡下，淋巴細(xì)胞各亞群形態(tài)相同，不能區(qū)別。觀察淋巴細(xì)胞的數(shù)量變化，有助于了解機(jī)體的免疫功能狀態(tài)。直接半數(shù)比間接推算的結(jié)果吏為可靠。

[原理] 用淋巴細(xì)胞稀釋液血液稀釋一定倍數(shù)，同時(shí)破壞紅細(xì)胞并將白細(xì)胞胞質(zhì)染淡紅色，使核與胞質(zhì)清晰可辯。結(jié)合淋巴細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)，在中倍和低倍鏡下容易總值別。稀釋后滴入計(jì)數(shù)盤(pán)中，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)滿(mǎn)面春風(fēng)淋巴細(xì)胞數(shù)，即可直接求得每升血液中淋巴細(xì)胞數(shù)。

[參考值] 成人：（1.684±0.404)×10⁹/L

學(xué)齡前兒童：(3.527±0.727)×10⁹/L

[臨床意義] 參考第二節(jié)“白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)”有關(guān)淋巴細(xì)胞部分。

第三節(jié)　儀器法血細(xì)胞檢查

前面章節(jié)已經(jīng)介紹了手工操作的血細(xì)胞計(jì)數(shù)方法�？砂l(fā)看出，由于操作地程的隨機(jī)誤差，實(shí)驗(yàn)器材的系統(tǒng)誤差及測(cè)方法本身的固有誤差，手工法細(xì)胞良數(shù)不但費(fèi)時(shí)費(fèi)力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精神桷性、準(zhǔn)確性也受影響。50年代初期，美國(guó)的庫(kù)爾特研制了電阻抗血細(xì)胞分析儀器開(kāi)創(chuàng)了血細(xì)胞分析的新紀(jì)元，隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展、高科技技術(shù)的應(yīng)用，特別是計(jì)算機(jī)技術(shù)的引用，血細(xì)胞分析儀的測(cè)量水平不斷得高，測(cè)量參數(shù)不斷增加。不但得高了醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)水平，還為臨床提供了更多的有用的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，對(duì)于某些疾病的診斷與治療具有重要的臨床意義。

一、電阻抗法血細(xì)胞分析儀測(cè)試原理

（一)白細(xì)胞分析原理

50年代初，庫(kù)爾特（W。H。Coulter)發(fā)避孕藥并申請(qǐng)了粒子計(jì)數(shù)技術(shù)的設(shè)計(jì)專(zhuān)利，其理是根據(jù)血細(xì)胞埋傳導(dǎo)的懷質(zhì)，以電解質(zhì)溶液中懸浮的白細(xì)胞在通過(guò)計(jì)數(shù)時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢查為基礎(chǔ)，進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積的測(cè)定，這種方法稱(chēng)為電阻抗法，也稱(chēng)為庫(kù)爾特原理（圖2-7)

圖2-7 電阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理

把用等滲電解質(zhì)溶液（被稱(chēng)為稀釋液,diluent)稀釋的細(xì)胞懸液侄入一個(gè)不導(dǎo)電的容器中，將小孔管插到細(xì)胞懸液中。小孔管是電阻抗法細(xì)胞計(jì)數(shù)的一個(gè)重要的組成部分，其內(nèi)側(cè)充滿(mǎn)了稀釋液，并有一個(gè)內(nèi)電極，外側(cè)細(xì)胞懸液中有一個(gè)外電極。檢測(cè)期間，當(dāng)電流以接通通后，位于小孔兩側(cè)的電極產(chǎn)生穩(wěn)定的電流。稀釋液通過(guò)小孔孔管壁上固有的小孔（直徑一般<100μm.厚度為75μm左右)向小孔內(nèi)部流動(dòng)。因?yàn)樾】走@壁充滿(mǎn)了具有專(zhuān)導(dǎo)性的液體，其電子脈沖是穩(wěn)定的。如果供給電流I和阻抗Z是穩(wěn)定的，根據(jù)歐姆定期律通過(guò)小孔的電壓E也是不變的（這時(shí)E=IZ)。當(dāng)有一個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，由于細(xì)胞的導(dǎo)電性質(zhì)比稀釋液要低，在電路中小孔感應(yīng)區(qū)內(nèi)的電阻的增加，于瞬間能上能下起了電壓變化而出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào)，自然數(shù)為通過(guò)脈沖。電壓增加的變化的程度取決于非傳導(dǎo)的細(xì)胞占據(jù)小孔感應(yīng)區(qū)的體積，即細(xì)胞體積越大，引起的脈沖越，產(chǎn)生的脈沖振幅越高，脈沖信號(hào)經(jīng)過(guò)下列步驟，得出細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。

1．放大：由于血細(xì)胞通過(guò)微孔時(shí)產(chǎn)生的脈搏沖訊號(hào)非常微弱，不能直接觸發(fā)計(jì)數(shù)電路，因此必須通過(guò)電子放大器械，將微伏訊號(hào)放大為優(yōu)級(jí)脈沖扭號(hào)。

2．甄別：通過(guò)微孔時(shí)的各種微粒均可產(chǎn)生相應(yīng)脈沖訊號(hào)，訊號(hào)電平（脈沖幅度)與微粒在小成正比。因除血細(xì)胞外，血中細(xì)胞外，血中細(xì)胞碎片、稀釋液中雜質(zhì)微粒均可產(chǎn)生假訊號(hào)，使計(jì)數(shù)結(jié)果偏高。所謂甄別就是利用甄別器根據(jù)閾值調(diào)節(jié)器提供的參考電平，將低于參考電平的假訊號(hào)去掉，以提高細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

3．閾值鹿茸：在一定范圍內(nèi)調(diào)節(jié)參考電平的大小，使計(jì)數(shù)結(jié)果可能符合實(shí)際。

4．整形：經(jīng)過(guò)放大和甄別后的細(xì)胞脈沖訊號(hào)波形尚不一致必須經(jīng)過(guò)整形器作用，修整為形伏一致標(biāo)準(zhǔn)的平頂波后，才能觸發(fā)電路。

5．計(jì)數(shù)：血細(xì)胞的脈沖信號(hào)，經(jīng)過(guò)放大、甄別、整形m.jfsoft.net.cn/yaoshi/后，送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)。各型血液分析儀器計(jì)數(shù)系統(tǒng)甄別方式不同，通過(guò)各種方式得出計(jì)數(shù)結(jié)果。（圖2-8)

圖2-8 儀器監(jiān)測(cè)屏上顯示白細(xì)胞通過(guò)脈沖

目前很多儀器在給出細(xì)胞數(shù)據(jù)結(jié)果之外，是時(shí)提供細(xì)胞體積分布圖形，這些可以表示出細(xì)胞群體分布情況的圖形，稱(chēng)為細(xì)胞分布直方圖（圖2-9)。直方圖是由測(cè)量通過(guò)感應(yīng)區(qū)的每個(gè)細(xì)胞脈沖累積得到的，是在計(jì)數(shù)的同時(shí)進(jìn)行分析測(cè)量的。如圖2-8所示，示波器顯示的是所分析的細(xì)胞的脈沖大小，圖2-9是相應(yīng)的體積分布直方圖，橫坐標(biāo)為體積，縱坐標(biāo)是血細(xì)胞的相對(duì)數(shù)量，血細(xì)胞分析儀在進(jìn)行細(xì)胞分析時(shí)將每個(gè)細(xì)胞的脈沖根據(jù)其體積大小分配并存在相應(yīng)的體積通道中，每個(gè)通收集的數(shù)據(jù)被統(tǒng)計(jì)出相對(duì)數(shù)并表示在“Y”軸上。體積數(shù)據(jù)以飛機(jī)升（fl)為單位，表示在X軸上。

在進(jìn)行白細(xì)胞體積分析時(shí)，儀器計(jì)算機(jī)部分可以將白細(xì)胞體積從35-450fl 分為256個(gè)通道(channal)，每個(gè)通道為1.64fl，細(xì)胞根據(jù)其大小被分別放在不同的通道中，從而得到白細(xì)胞體積分布的地直方圖。（圖2-10)

圖2-9 細(xì)胞體積直方圖

圖2-10 三部法血液分析儀白細(xì)胞分布直方圖

經(jīng)過(guò)溶血?jiǎng)┨幚砗蟮陌准?xì)胞可以根據(jù)體積大小初步確認(rèn)其相應(yīng)的細(xì)胞群：第一群是小細(xì)胞區(qū)，主要是淋巴細(xì)胞。第二群是單個(gè)核細(xì)胞區(qū)，也被稱(chēng)為中間細(xì)胞（MID)，包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞，核象左移或白血病可有各階段幼稚細(xì)胞及白血病細(xì)胞。第三群是大細(xì)胞區(qū)，主要是中性粒細(xì)胞（GRAN)。儀器根據(jù)各亞群占總體的比例計(jì)算出各亞群的百分率，如果與該標(biāo)本的白細(xì)胞總數(shù)相乘，即得到各類(lèi)細(xì)胞的絕對(duì)值�？梢钥闯觯�電阻法只是根據(jù)細(xì)胞體積的大小，將白細(xì)胞分成幾個(gè)群體。在一個(gè)群體中，可能發(fā)某種細(xì)胞為主（如小細(xì)胞區(qū)主要是淋巴細(xì)胞)，但由于細(xì)胞體積間的交叉，可能還有其它細(xì)胞的存在。顯然習(xí)慣上甩稱(chēng)的“三分類(lèi)、”“二分類(lèi)”血細(xì)胞分析儀達(dá)個(gè)名稱(chēng)是不夠確切的。國(guó)外多采用“三部法”（3-part)或“二部法”(2-part)稱(chēng)之。國(guó)內(nèi)也有專(zhuān)家建議使用“三分群”或“二分群”描述電阻抗法血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類(lèi)。

（二)紅細(xì)胞測(cè)試原理

根據(jù)各項(xiàng)參數(shù)在血液分析儀檢測(cè)原理的不同，檢測(cè)大致分為三個(gè)部分。

1．紅細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞比積迄今，絕大多數(shù)血液分析儀使用電阻抗法進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞比積測(cè)定，其原理同白細(xì)胞一樣。紅細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，形成的相應(yīng)的脈沖的多少即紅細(xì)胞的數(shù)目，脈沖的高度代表單個(gè)脈沖細(xì)胞的體積。脈沖高度疊加經(jīng)換算即可得到紅細(xì)胞的比積（有的儀器先以單個(gè)細(xì)胞高度計(jì)算平均紅細(xì)胞容積（MCV)，再乘以紅細(xì)胞的數(shù)得出紅細(xì)胞比積。)稀釋的血液進(jìn)入紅細(xì)胞檢測(cè)通道時(shí)，其中含有白細(xì)胞，因此，紅細(xì)胞檢測(cè)的各項(xiàng)參數(shù)均含有白細(xì)胞因素，但正常血液有形成分中白細(xì)胞比例很少，故其影響可忽略不計(jì)，要某種病理情m.jfsoft.net.cn/shouyi/況下，如白血病，白細(xì)胞數(shù)明顯增加而又伴嚴(yán)重貧血時(shí)，即可使所得務(wù)項(xiàng)參數(shù)產(chǎn)生明顯誤差。根據(jù)所測(cè)單個(gè)紅細(xì)胞體積及相同體積細(xì)胞占總體的比例，可打印出紅細(xì)胞體積分布直方圖。

2．血紅蛋白測(cè)定：任何類(lèi)型、檔次的血細(xì)胞分析儀，血紅蛋白測(cè)定原理是相同的。被稀釋的血液的加入溶血?jiǎng)┖�，紅細(xì)胞溶解，釋放血紅蛋白，后者與溶血?jiǎng)┙Y(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進(jìn)入血紅蛋白測(cè)試系統(tǒng)，在特定波長(zhǎng)（一般在530-550nm)下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成比例，儀器便可顯示Hb濃度。不同系列血液分析儀配套溶血?jiǎng)┡浞讲煌�，形成的血紅蛋白衍生物亦不同，吸光度各異但最大吸收峰均接近540nm .這是因?yàn)镮CSH推薦的氰化高鐵法，HICN最大吸收峰在540nm。校正儀器必須以HICN值為標(biāo)準(zhǔn)。大多數(shù)系列血液分析儀溶血?jiǎng)﹥?nèi)均含有氰化鉀，與血紅蛋白作用后形成氰化血紅蛋白（注意不是氰化高鐵血紅蛋白)，其特點(diǎn)是顯色穩(wěn)定，最大吸收峰接近540nm，但吸收光譜與HICN有明顯的不同。此點(diǎn)在儀器校正時(shí)應(yīng)十分注意。

為了減少溶血?jiǎng)┑亩拘�，避免含氰化的血紅蛋白衍生物檢測(cè)后的污物處理，近年來(lái)，有些血液分析儀使用非氰化溶血?jiǎng)�（如SLS-HB)實(shí)驗(yàn)證明，形成的衍生物與HICN吸收光譜相似，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性、準(zhǔn)確性達(dá)到含有氰化物溶血?jiǎng)┩瑯铀�平。既保證了實(shí)驗(yàn)質(zhì)量又避錫了試劑對(duì)分析人員的毒性和環(huán)境污染。

3．各項(xiàng)紅細(xì)胞指數(shù)檢測(cè)原理：同一手工法一樣，MCV、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC)、紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW)均是根據(jù)儀器檢測(cè)，的紅細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞比積和血紅蛋白量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，經(jīng)內(nèi)存電腦換算出來(lái)的。

RDW由血液分析儀器測(cè)量后獲得，是反映外周血紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù)。簡(jiǎn)言之，是反映紅細(xì)胞大小不等的客觀指標(biāo)。多數(shù)儀器用所測(cè)紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)來(lái)表示，即RDW-CV，也有的儀器采用RDW-SD報(bào)告方式。

紅細(xì)胞通進(jìn)小孔的一瞬間，計(jì)數(shù)電路得到一個(gè)相應(yīng)的大小的脈沖，脈沖的高度是由細(xì)胞體積大小決定的，不同大小的脈沖的信號(hào)分別貯存在儀器內(nèi)裝計(jì)算機(jī)的不同通道內(nèi)，計(jì)算出相應(yīng)的體積及細(xì)胞數(shù)后，統(tǒng)計(jì)處理而得RDw 值。由于RDw 來(lái)自十幾秒內(nèi)近萬(wàn)個(gè)紅細(xì)胞的檢測(cè)數(shù)據(jù)，不但愿可以克服測(cè)量紅細(xì)胞直徑時(shí)人為制片因素和主觀因素等影響，還較P-J曲線(xiàn)更能直接、客觀、及時(shí)地反映紅細(xì)胞大小不等程度，對(duì)貧血的診斷有重要意義。RDW的正常參考范圍見(jiàn)表2-4。

表2-4 RDW正常參考范圍

*為北京協(xié)作組六家醫(yī)院使用五種型號(hào)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀調(diào)查2013例成人（男1013例，女1000例)RDW結(jié)果。

（三)血小板分析原理

目前有半自動(dòng)、全自動(dòng)兩種血細(xì)胞分析儀器儀器的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)微孔旁有一股穩(wěn)定持續(xù)的稀釋液流，稱(chēng)掃洗液體。其流向與孔呈直角，使計(jì)數(shù)后的流體流走，可防止計(jì)數(shù)后細(xì)胞重新進(jìn)入循環(huán)。計(jì)算機(jī)還可進(jìn)行一次校正，即對(duì)有多個(gè)細(xì)胞是時(shí)經(jīng)過(guò)通道時(shí)，只計(jì)一個(gè)脈沖數(shù)情況的校正。校正指數(shù)與計(jì)數(shù)值多少相關(guān)。另釘，用一個(gè)脈沖編排器消除中心軸外的顆粒計(jì)數(shù)及檢測(cè)各種細(xì)胞經(jīng)小孔時(shí)引起的電阻變化，脈沖經(jīng)數(shù)學(xué)化后，數(shù)字被送到記憶線(xiàn)路全程，儲(chǔ)存于體積通道中，形成直方圖。血小板計(jì)數(shù)儲(chǔ)存于64道直方圖范圍為2-20fl。不同儀器血小板直方圖的范圍不一。平均血小板體積就是此平整曲線(xiàn)所含的群體算術(shù)平均體積，所以MPV也就是PLT大小分布直方圖的產(chǎn)物。為了使血小板更準(zhǔn)確，有些儀器專(zhuān)門(mén)設(shè)置了增加血小板準(zhǔn)確性的技術(shù)，如鞘流技術(shù)、浮動(dòng)界標(biāo)、擬合曲線(xiàn)等。

二、血細(xì)胞分析儀檢測(cè)參數(shù)的臨床意義

（一)細(xì)胞直方圖的應(yīng)用

1．白細(xì)胞直方圖變化的臨床意義，前已述及，在進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，細(xì)胞根據(jù)體積大小分配在不同計(jì)算機(jī)通道中，從而得到白細(xì)胞體積分布直方圖。反之從圖形的變化可以會(huì)計(jì)被測(cè)血液中細(xì)胞群體的變化。這種變化細(xì)胞圖形并無(wú)特異性。比如中間細(xì)胞群可包括大淋巴細(xì)胞、原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞，其中任何一類(lèi)細(xì)胞的增多，均可使直方圖產(chǎn)生相似變化，只是提示檢查者粗略者判斷細(xì)胞比例變化或有無(wú)明顯的異常細(xì)胞出現(xiàn)，進(jìn)而在顯微鏡下檢查中注意這些變化或在正常人體栓中，篩選是否需要進(jìn)一步作血涂片檢查。圖2-11顯不的是各種血液學(xué)異常時(shí)，直方畋的變化，可以看出，盡管引起血液學(xué)變化的病因不同、細(xì)胞形態(tài)變化不同，但直方圖型很相似，說(shuō)明白細(xì)胞直方圖形變化并無(wú)特異性。

圖2-11 不同疾病白細(xì)胞分布直方圖

圖中橫坐標(biāo)為細(xì)胞體積，縱坐標(biāo)為細(xì)胞相對(duì)數(shù)量，黑色區(qū)域是正常細(xì)胞分布圖

（a)來(lái)自末梢血淋巴細(xì)胞增多（其中大顆粒淋巴細(xì)胞占42％)

（b)為急性非淋巴細(xì)胞性白血�。∕₂)（其中幼稚細(xì)胞占72％)的圖形

（c)為急性淋巴細(xì)胞白血病（L₂)（幼稚細(xì)胞63％)的圖形

另外，白細(xì)胞直方圖的變化也可反映某些人為的或現(xiàn)變化擾白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類(lèi)計(jì)數(shù)的情況，比如外周血出現(xiàn)有核紅細(xì)胞或巨大血小板，采血時(shí)由于技術(shù)大兵在造成血小板聚集或某些病理因素使紅細(xì)胞膜對(duì)溶血?jiǎng)┯械挚棺饔�，使紅細(xì)胞溶血不完全，以至測(cè)檢標(biāo)本中大量紅細(xì)胞膜碎片等情況，均可使白細(xì)胞直方圖在50fl以下區(qū)域出現(xiàn)一個(gè)或大或的小峰。因此當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)這種圖形時(shí)，提示白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類(lèi)計(jì)數(shù)均不準(zhǔn)確，需在采取相應(yīng)的手段進(jìn)一步檢測(cè)。

2．紅細(xì)胞體積直方圖的臨床意義：與白細(xì)胞直方務(wù)圖意義不同，某些貧血紅細(xì)胞體積直方圖的其特點(diǎn)，此種圖形變化再結(jié)合其它參數(shù)進(jìn)行分析，對(duì)鑒別診斷頗有價(jià)值。分析時(shí)，要注意觀察圖形的位置，峰底的寬度、峰頂?shù)男螒B(tài)及有無(wú)雙峰出象。

下面介紹幾種貧血時(shí)圖形變化：

（1)缺鐵性貧血的直方圖（2-12A)：其特點(diǎn)為曲線(xiàn)波峰左移，峰底變寬，顯示小細(xì)胞不均一性。

（2)輕型β-血紅蛋白合成障礙（β-珠蛋白障礙性貧血)的直方圖圖形表現(xiàn)為小峰左移，峰底變窄，典型的小細(xì)胞均一性貧血。

（3)鐵粒幼細(xì)胞性貧血的直方圖顯示紅細(xì)胞呈典型的“雙形”性改變（即同時(shí)存在著兩類(lèi)型的紅細(xì)胞，一種是低色素紅細(xì)胞，另一種是正常形態(tài)的紅細(xì)胞)多見(jiàn)于鐵粒幼細(xì)胞性貧血。在缺鐵性貧血經(jīng)治療有效時(shí)，也可出現(xiàn)類(lèi)似的圖形，但峰底要更寬些。

（4)順?biāo)崛狈σ�起的巨連續(xù)劇細(xì)胞性貧血治療前與治療后的直方圖治療前直方圖波峰右移，峰底增寬，顯示明顯的大細(xì)胞不均一性，是葉酸或維生素B₁₂缺乏引起巨連續(xù)劇細(xì)胞性貧血的重要直方圖特征。給予葉酸或維生素B₁₂后，幼稚細(xì)胞分化成熟正常，正常紅細(xì)胞逐步釋放入血液，而病理細(xì)胞并完全消亡，檢測(cè)時(shí)即再出現(xiàn)雙峰形，說(shuō)明治療有效。

應(yīng)該指出，不同型號(hào)儀器其特點(diǎn)及使用稀釋液不同，紅細(xì)胞直方圖的形態(tài)亦異常，但反映病理變化基本特征是相同的，不同實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本室儀器的圖形進(jìn)行對(duì)比分析。

3．血小板直方圖的變化：血小板測(cè)量結(jié)果是根據(jù)血小板直方圖得出的，微機(jī)根據(jù)直方圖形態(tài)，繪出擬合曲線(xiàn)，決定大血小板數(shù)目的補(bǔ)償并計(jì)算MPV、PCT、PSW各項(xiàng)參數(shù)。當(dāng)測(cè)標(biāo)本中小細(xì)胞增多或出現(xiàn)細(xì)胞碎片或血小板凝聚時(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，血小板體積直方圖均能反映這些變化。因此在發(fā)出血小板報(bào)告之前，首先要觀察其圖形是否正常，如為異常的圖形（見(jiàn)圖2-13)，均為檢查血液是整流器有血小板凝聚，必要時(shí)作血涂片檢查是否有小紅細(xì)胞或大血小板增多現(xiàn)象。

圖2-12 不同類(lèi)型貧血紅細(xì)胞體積分布直方圖

（圖中橫會(huì)標(biāo)是細(xì)胞體積（fl)，縱坐標(biāo)代表紅細(xì)胞相對(duì)數(shù)量。黑色區(qū)域是正常圖形)

（A)缺鐵性貧血圖形

（B)輕型珠蛋白生成障礙性貧血

（C)鐵粒幼細(xì)胞貧血圖形

（D)、（E)治療前后巨幼細(xì)胞性貧血圖形

圖2-13 不同情況血小板體積直方圖

圖中橫坐標(biāo)為血小板體積（fl)縱坐標(biāo)代表血小板相對(duì)數(shù)量，黑色區(qū)域是正常圖形

（a)標(biāo)本中含有大量紅細(xì)胞碎片引起圖形變化

（b)標(biāo)本中有多數(shù)血小板聚集

（c)由于標(biāo)本中小紅細(xì)胞增多所致

（二)RDW的臨床意義

1．鑒別缺鐵性貧血和β-珠蛋白生成障礙性貧血，由于Hb合成障礙，缺鐵性貧血和輕型β-珠蛋白生成障礙性性貧血均可表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性貧血，但前者紅細(xì)胞形態(tài)明顯小于不等，后者形態(tài)大小較為均一。Bassman曾分析了兩類(lèi)貧血患者的RDW變化，發(fā)出53例缺鐵性貧血RDW全部增高（異常率為100%)，而44例輕型β-珠蛋白生成障礙性貧血中38例中RDW正常（正常率為88%)他認(rèn)為RDW可作為此兩類(lèi)貧血篩選及鑒別指標(biāo)。

2．診斷向?qū)цF性貧血：鑒于95%以上的缺鐵性貧血的RDW均異常，一般認(rèn)為，如果患者血液檢查表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性貧血而RDW正常，此類(lèi)病人患缺鐵性貧血的可能性不大。

3．進(jìn)行貧血的新形態(tài)學(xué)分類(lèi)（MCV/RDW分類(lèi))根據(jù)不同病因引起的貧血的紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)不同，Bassman（1983)觀察各種貧血紅細(xì)胞參數(shù)變化，提出了MCV、RDW貧血分類(lèi)法（見(jiàn)表2-5)將其分成六類(lèi)。實(shí)踐癥明：這種分類(lèi)方法更能反映貧血的病理變化對(duì)貧血的鑒別診斷有一定參考價(jià)值。

表2-5 MCV、RDW 貧血分類(lèi)法

（三)血小板測(cè)量參數(shù)的臨床意義

1．涸小板各項(xiàng)參數(shù)的正常參考范圍：有文獻(xiàn)報(bào)道國(guó)內(nèi)2013例正常人成人血小板計(jì)數(shù)參考范圍大致為（100-300)×10⁹/L，而MPV和參考值并非一個(gè)統(tǒng)一的范圍。Bassmen測(cè)量683例年齡為20-34歲正常人積壓小板數(shù)和MPV值，發(fā)現(xiàn)人種及性別間無(wú)顯明差異，但MPV的正常范圍地隨群體中不同血小板數(shù)量而變化的，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果設(shè)計(jì)了一個(gè)關(guān)于血小板數(shù)和血小板體積的列線(xiàn)圖（見(jiàn)圖2-14)，用于分別估計(jì)每個(gè)人的結(jié)果是否異常。

圖2-14 血小板數(shù)與MPV的關(guān)系

2．血小板各項(xiàng)參考測(cè)定的臨床意義

（1)血小板計(jì)數(shù)的臨床意義：見(jiàn)第三章

（2)MPV變化的臨床意義：各種疾病PLT 與MPV可出現(xiàn)以下幾外方面結(jié)果：1)血小板數(shù)低而MPV增升高：骨髓自身正常，但外周血血小板破壞增多造成血小板降低的刺激后反應(yīng)性增生時(shí)，巨核細(xì)胞DNA倍體數(shù)及細(xì)胞大小都增加， MPV也增高。由于骨髓受抑制而造成血小板減少的病人在恢復(fù)初期MPV也升高，這主要因外周血血小板數(shù)減低應(yīng)激性地致使巨核細(xì)胞倍體數(shù)增加所致。

2)血小板數(shù)高、MPV正常：骨髓增生性疾病如血小板增多，紅細(xì)胞增多但MPV正常。

3)血小板數(shù)與MPV值均下降：AIDs （艾滋病)病毒直接影響巨核細(xì)胞并導(dǎo)致血小板減少。大約2/3的病人血小板數(shù)降低，92%的病人MPV值下降，與骨髓受抑時(shí)的血小板狀態(tài)相似�；及l(fā)育不良性貧血的病人積壓小板數(shù)通常都降低，其MPV值也低，但 PDW升高。當(dāng)骨髓纖維化或被脈沖瘤細(xì)胞浸潤(rùn)危及正常造血時(shí)，血小板數(shù)減少，隨即MPV值也降低。再生障礙性貧血，骨髓瘤或白血病化療后，敗血癥所致血小板沽少等骨髓受抑性疾病中，雖然仍可能有一些大血小板，但血小板的平均體積減小。

4)MPVE值與血小板數(shù)都升高：反應(yīng)性血小板增多癥病人中，其MPV值升高，因血液的流失和本內(nèi)損傷造成的急性大失血都可使血小板值上升。

5) MPV值升高而血小板正常：慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓纖維化、脾切除均可周到MPV升高，慢性髓細(xì)胞性白血病和骨髓纖維化主要使骨髓增生異常，兩種疾病中，血小板體積經(jīng)常增大并大小不均。外周血涂片中可出現(xiàn)大血小板。半數(shù)α-型和β-型珠蛋白生成障礙性貧血的患者有4種明顯的血液學(xué)改變；血小板大小改變、紅細(xì)胞大小改變、肝珠蛋白改變和對(duì)瘧原蟲(chóng)抵抗力改變。其MPV值增高而血小板數(shù)正常。

另外，因?yàn)镸PV先于 PLT變化，因此，可用于觀察病情變化。白血病化療時(shí)，MPV上升是 BM恢復(fù)的第一特征。在感染時(shí) Lelie等認(rèn)為，局部炎癥的 MPV正常而敗血癥中則一半病人有MPV增加；并認(rèn)為 MPV持續(xù)低時(shí)，說(shuō)明存在感染未控制而繼續(xù)抑 PLT抑生成，如MPV隨 PLT數(shù)持續(xù)下降則為骨髓衰竭的特征。 MPV越小越嚴(yán)重，直到 MPV上升，PLT數(shù)才恢復(fù)。 Elder每日檢測(cè) MPV并觀察結(jié)果，以了解出血性素質(zhì)病人的變化，發(fā)現(xiàn)有出血傾向者M(jìn)PV顯著低于無(wú)出血傾向者，即使嚴(yán)重 PLT下降者，如 MPV>6.4fl，出血發(fā)生率也低。Thompson研究結(jié)果表明MPV與PLT體外功能之間明顯相關(guān)，對(duì)佼原和凝血酶誘導(dǎo)的PLT聚集，其速度信程度隨MPV增加而增加。

三、方法學(xué)評(píng)價(jià)

白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi)有兩種方法：一種是顯微目視法，一種是血液分析儀方法。顯微鏡法是基礎(chǔ)，血細(xì)胞分析儀在要根據(jù)顯微鏡法準(zhǔn)確計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行校正后方能使用，但這種計(jì)數(shù)不同于常規(guī)工作進(jìn)行的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)研究白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的總變異系數(shù)為：

（公式中nb為所見(jiàn)實(shí)際數(shù)目，nc為用計(jì)算盤(pán)的次數(shù)，np為用吸管的次數(shù))。

在一個(gè)標(biāo)本中，只有使用多支吸管，使用多次（個(gè))計(jì)數(shù)盤(pán)，計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量達(dá)到一定程度時(shí)，才能避免細(xì)胞在計(jì)數(shù)盤(pán)分布的固有誤差，計(jì)數(shù)盤(pán)和吸管的系統(tǒng)誤差和操作隨機(jī)誤差的影響，使計(jì)數(shù)結(jié)果接近真值。一般在進(jìn)行血細(xì)胞分析儀校正時(shí)，應(yīng)使用這種方法。但實(shí)常規(guī)檢驗(yàn)中，目視法很難達(dá)一上述在求。由于上述各方面誤差的影響，白細(xì)胞計(jì)數(shù)的重復(fù)性和準(zhǔn)確相對(duì)較差。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格校正的血細(xì)胞分析儀，由于計(jì)數(shù)細(xì)胞多，計(jì)數(shù)的每個(gè)步驟都可標(biāo)準(zhǔn)化，便于質(zhì)量控制（特別是全自動(dòng)血液分析儀)，計(jì)數(shù)的精確性、準(zhǔn)確性均較高（CV可在2%以下)。這一點(diǎn)在紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)時(shí)也是相似的。

儀器法白細(xì)胞分類(lèi)有兩大類(lèi)：一類(lèi)是電阻抗法，這類(lèi)儀器是根據(jù)溶血?jiǎng)┳饔煤蟮陌准?xì)胞大小，人為地分成幾個(gè)部分，顯然這種分類(lèi)是不夠準(zhǔn)確的。另一類(lèi)是利物用各種高科技技術(shù)聯(lián)合對(duì)同一白細(xì)胞的體積、細(xì)胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒進(jìn)行檢測(cè)，綜合分析后，進(jìn)行細(xì)胞分類(lèi)。這種多方位檢測(cè)分類(lèi)法，可較準(zhǔn)確地進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)，但仍不能準(zhǔn)確地檢查白細(xì)胞形態(tài)的病理變化，特別是對(duì)幼稚白細(xì)胞的檢測(cè)。因此必須強(qiáng)調(diào)，儀器法白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)，只能提供正常血液標(biāo)本（血紅蛋白、白細(xì)胞數(shù)、血小板數(shù)均正常)中各種白細(xì)胞數(shù)目的大致分布情況或?yàn)槌Ｒ?guī)工作進(jìn)一步鏡檢提供篩選的信息，而決定不能完全代替油浸顯微鏡下進(jìn)行的白細(xì)胞分燈檢查，另外由于目視法與儀器法實(shí)驗(yàn)方法的不同，且全自動(dòng)力血液分析儀多使用靜脈血檢測(cè)，儀器法測(cè)定值的參考范圍與傳統(tǒng)使用的目視法的參考值有所差異，表2-6是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)介紹的靜脈血全自動(dòng)血細(xì)胞公析儀的正常參考范圍。

表2-6（1) 血細(xì)胞分析儀檢測(cè)靜脈血各項(xiàng)參數(shù)胡考值

表2-6（2) 血細(xì)胞分析儀檢測(cè)靜脈血各項(xiàng)參數(shù)參考值 [續(xù)表（1)]

1)摘自：周子秋主編，實(shí)用臨床檢查，1993

2)摘自：Williams 主編，hematology，第15版，1995

3)摘自：北京市成人靜脈血正常參考值調(diào)查，中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1996（3)

4)摘自：Bassmen主編， Automateb BloocBlood Countw and Differentials，1986

雖然血液分析儀提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性，但先進(jìn)的儀器應(yīng)用，必須有一套全面質(zhì)量管理措施，性質(zhì)在有高素質(zhì)的技術(shù)人員。這方面包括：

1．操作人員上崗前的培訓(xùn)

（1)上崗前在接受良好的培訓(xùn)。要對(duì)儀器的原理、操作規(guī)程、使用注意事項(xiàng)、異常報(bào)警的含義、引起實(shí)驗(yàn)誤差的因素及如何維護(hù)要有充分的了解，掌握ICSH推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法校正儀器的每一個(gè)測(cè)試參數(shù)的程序。

（2)注意在分析前、中、后每一步的質(zhì)量控制，注意病人生理或病理因素給實(shí)驗(yàn)造成的誤差或服用藥物的干擾作用。隨時(shí)監(jiān)控儀器的工作狀態(tài)，注意工作環(huán)境的電壓變化和磁場(chǎng)、聲的干擾。根據(jù)質(zhì)控圖的變化及時(shí)進(jìn)行儀器的調(diào)試，測(cè)試后要根據(jù)臨床診斷、直方圖變化、各項(xiàng)參數(shù)的關(guān)系，確認(rèn)無(wú)誤后方能發(fā)出報(bào)告。

2．儀器的鑒定：新儀器安裝后，或每次維修后，必須對(duì)儀器的技術(shù)性能進(jìn)行測(cè)試和評(píng)價(jià)，這對(duì)保證檢驗(yàn)質(zhì)理將起到重要作用。ICSH公布了對(duì)電子血球計(jì)數(shù)儀的評(píng)價(jià)方案。在細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定方面在鑒定儀器測(cè)試杯本的總變異、攜帶污染率、線(xiàn)性范圍、可比性和準(zhǔn)確性。一般而言，白細(xì)胞計(jì)數(shù)總變異在3%以睛，攜帶污染率小于2%，線(xiàn)性范圍較寬，重復(fù)性小于3%時(shí)，可滿(mǎn)足臨床測(cè)試需在。在電阻抗法白細(xì)胞分類(lèi)部分應(yīng)注意細(xì)胞分類(lèi)結(jié)果的重復(fù)性，與顯微鏡檢查的相關(guān)程度及能否在直方圖顯示血液中存在一定數(shù)量異常細(xì)胞等。

3．儀器的校正：儀器經(jīng)鑒定全格且，需要進(jìn)一步校正，校正方法根據(jù)不同儀器的要求進(jìn)行。校正時(shí)最好使用經(jīng)參考（此儀器已用國(guó)際參考方法校正)標(biāo)定的新鮮血液。在無(wú)參考儀器的單位，應(yīng)用嚴(yán)格手工法得出各項(xiàng)參數(shù)值后，進(jìn)行儀器校正。

4．標(biāo)本的采集和運(yùn)送：全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀一般在求用抗凝的靜脈血，盡可能不用皮膚穿刺采血，因?yàn)椴煌�部位皮膚穿刺血的細(xì)胞成分和細(xì)胞與血漿的比例常不一致與靜脈血的差別則更大，從技術(shù)角度講，毛細(xì)管采血時(shí)較少，特別對(duì)一些全自動(dòng)的儀器，不易采到足夠量血，更不能在有疑問(wèn)時(shí)重復(fù)檢查。因此除少數(shù)不易取得靜脈血，如嬰兒、大面積燒傷及某些需要經(jīng)黨采血檢查的病例（如血液病、腫瘤化療等)外，均就用靜脈血做實(shí)驗(yàn)。使用半自動(dòng)血液分析儀時(shí)也可用手指血進(jìn)行。

上述抗凝血在室濕下，WBC、RBC、PLT可穩(wěn)定24h，白細(xì)胞分類(lèi)可穩(wěn)定6-8h，血紅蛋白可穩(wěn)定數(shù)日。但鏡下白細(xì)胞分類(lèi)，2小時(shí)后粒細(xì)胞形態(tài)即有變化，故需作鏡檢下分類(lèi)者，應(yīng)及早推制血片。雖然4⁰C條件可延長(zhǎng)血液貯存期，但血小板不宜在低溫下貯存，因會(huì)影響PLt MPV值，故如不能及時(shí)檢查時(shí)，血液應(yīng)在室溫保存。

5．操作有員在分析中應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題

（1)測(cè)試時(shí)試劑的溫度對(duì)結(jié)果的影響：血液分析儀細(xì)胞計(jì)數(shù)最適溫度為18-22⁰C，低于15⁰C，高于30⁰C抱歉對(duì)結(jié)果有影響。其原因可能是由于溫度不同，致使細(xì)胞體積發(fā)生變化，而影響體積的測(cè)量，進(jìn)而改變細(xì)胞粘度分布曲線(xiàn)，影響細(xì)胞計(jì)數(shù)。

（2)溶血?jiǎng)┑挠昧考叭苎獣r(shí)間，對(duì)血小板、白細(xì)胞計(jì)數(shù)影響：全自動(dòng)俯器由于在機(jī)內(nèi)自動(dòng)加溶血?jiǎng)┎⒍〞r(shí)檢測(cè)可避免其影響，但使用半自動(dòng)儀器進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，是要血液預(yù)稀釋后加入溶血?jiǎng)�，溶血后進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類(lèi)計(jì)數(shù)，因此溶血?jiǎng)┝考叭苎�的時(shí)間至關(guān)重要。加溶血?jiǎng)┑牧坎煌�或加后放置時(shí)間過(guò)短，以致使溶血不完全；或放置時(shí)間太久使白細(xì)胞明顯變形（阻抗法儀器分類(lèi)是以白細(xì)胞體積作為分群依據(jù)的，加溶血?jiǎng)┖蟀准?xì)胞膜溶解，胞質(zhì)大部分溢出，整個(gè)細(xì)胞體積縮小，僅留下核和部分顆粒)，均可導(dǎo)致計(jì)數(shù)誤差，甚至用儀器不能進(jìn)行分群計(jì)數(shù)。

（3)儀器的半堵孔現(xiàn)象：根據(jù)檢測(cè)器上微孔堵塞的程度，通常將其分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。如發(fā)生完全堵孔，血細(xì)胞不能通過(guò)微孔計(jì)數(shù)，也不顯示結(jié)果，有的儀器還同時(shí)在屏幕上顯示clog，所以完全堵孔很容易判斷。不完全堵孔主要通過(guò)下述方法判斷：①觀察計(jì)數(shù)時(shí)間；②觀察示波動(dòng)器波形；③看計(jì)數(shù)批示燈閃動(dòng)，如該燈閃動(dòng)無(wú)規(guī)律常是不完全堵孔表現(xiàn)。

（4)病理因素對(duì)血液分析儀使用的影響：①由于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統(tǒng)增殖性疾病、轉(zhuǎn)移癌、自身免疫性疾病、感染及某些原因不明疾病血中含有冷球蛋白，或骨髓瘤、癌癥、白血病、妊娠、血栓疾病、溏尿病病人血中存在有冷纖維蛋白等，均可導(dǎo)致血液中某些物質(zhì)凝集，致使血細(xì)胞計(jì)數(shù)增高。此時(shí)將稀釋標(biāo)本放在37⁰C水浴10分鐘后立即計(jì)數(shù)可消除此影響；②血液中白細(xì)胞顯著增高而影響紅細(xì)胞計(jì)數(shù)劃有核紅細(xì)胞出現(xiàn)而影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)；③低色素必貧血或紅細(xì)胞內(nèi)含大量sHb或HbCO而抵抗溶血?jiǎng)┳饔脮r(shí)，紅細(xì)胞溶解不完全；④某些新生兒或某些肝病病人紅細(xì)胞膜質(zhì)類(lèi)異常，抗溶血?jiǎng)┳饔茫瑢?dǎo)致紅細(xì)胞溶血?jiǎng)┎煌耆�；⑤多發(fā)性骨髓瘤的M蛋白增多時(shí)，Ph低的情況下，M蛋白可與溶血?jiǎng)┌l(fā)生反應(yīng)而使結(jié)果偏高；⑥各種病順引起的血栓前狀態(tài)使血小板易于聚集，機(jī)時(shí)影響結(jié)果。

6．分析后注意事項(xiàng)

（1)根據(jù)直方圖及參考數(shù)變化確定計(jì)數(shù)結(jié)果是否準(zhǔn)確及是否需要顯微鏡檢查：前已述及，標(biāo)本中出現(xiàn)小的凝塊或血小板聚集時(shí)可影響白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板計(jì)數(shù)。這些影響可在直方圖中顯示出來(lái)，因此在發(fā)生白細(xì)胞分燈的結(jié)果吸是在正常人體格檢查世界形勢(shì)血液檢查務(wù)項(xiàng)參數(shù)均正常時(shí)，作為白細(xì)胞分類(lèi)的參考。

（2)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果各參數(shù)之間的關(guān)系：實(shí)驗(yàn)結(jié)果的各項(xiàng)的胡數(shù)之間有內(nèi)在聯(lián)系，比如RBC、HCT（紅細(xì)胞壓積)與MCV；HB、RBC與MCH之間，又如RDW與涂片的紅細(xì)胞形態(tài)變化之間，都有明顯的相關(guān)關(guān)系。加外還可以分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床資料的相關(guān)關(guān)系，相關(guān)檢查對(duì)于實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的未預(yù)料的結(jié)果，是否可以從臨床角度加以解釋?zhuān)�或是否與其它實(shí)驗(yàn)有關(guān)的分析均十妥重要，例如Hb值過(guò)高或過(guò)低，是否可用輸血、大量失水或出血、溶血來(lái)解釋。此外，MCHC的高或低與瑞特染色的血片上紅細(xì)胞中血紅蛋白量情況是否一致；白細(xì)胞與血小板計(jì)數(shù)值是否與血片上白細(xì)胞、血小板公布情況相一致等相互參照，對(duì)保證質(zhì)量均有重要價(jià)值。

（3)定期征求臨床醫(yī)護(hù)人員對(duì)本室結(jié)果的評(píng)價(jià)：臨床醫(yī)生對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)也是質(zhì)理控制的重要環(huán)節(jié)，臨床醫(yī)生最熟悉病人的病情變化和疾病的發(fā)展過(guò)程，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是否符合臨床也是衡量結(jié)果正確與否的重要依據(jù)之一，因此，實(shí)驗(yàn)室要經(jīng)常定期聽(tīng)取臨床醫(yī)生的意見(jiàn)，以不斷改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的工作。

四、血細(xì)胞分析儀應(yīng)用進(jìn)展

隨著高技術(shù)的引用和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，各種類(lèi)型的血液分析儀相繼問(wèn)世。其進(jìn)展主要表現(xiàn)在以下幾方面：

（一)儀器測(cè)試原理的改進(jìn)

這些儀器主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類(lèi)部分的改進(jìn)，即電阻抗法的三分群發(fā)展為多項(xiàng)技術(shù)聯(lián)合同時(shí)檢測(cè)一個(gè)細(xì)胞，綜合分格實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得出的較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞分群結(jié)果。迄今，世界上應(yīng)用的這類(lèi)儀器主要有以下四種類(lèi)型。

1．容量、電導(dǎo)、光散射（VCS)白細(xì)胞分類(lèi)法VCS(volume conductivity lightscantter)技術(shù)可使血細(xì)胞在未經(jīng)任何處理，與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測(cè)結(jié)果。首先在標(biāo)本內(nèi)中入只作用于紅細(xì)胞的溶血?jiǎng)┦辜t細(xì)胞溶解，然后加入抗溶血?jiǎng)�，起中和前述溶血�(jiǎng)┑淖饔�，使白�?xì)胞表面、胞質(zhì)及細(xì)胞大小等特征仍然保持與體內(nèi)時(shí)間相同的狀態(tài)。

根據(jù)流體力學(xué)的原理使用鞘流技術(shù)使溶血后液體內(nèi)剩余的白細(xì)胞單個(gè)通過(guò)檢測(cè)器，VCS三種技術(shù)的同時(shí)檢測(cè)，體積的測(cè)量使用的是電阻抗原理。電導(dǎo)性是根據(jù)細(xì)胞壁能產(chǎn)生高頻電流的性能，采用高頻電磁探針測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu) — 細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)的比例，細(xì)胞骨的化學(xué)成分，以此來(lái)幫助鑒別細(xì)胞。因此電導(dǎo)性可辨別體積完全相同的而性質(zhì)量同的兩個(gè)細(xì)胞群。如小淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞兩者直徑均為9-12μm，當(dāng)前高頻電流通過(guò)這兩種細(xì)胞時(shí)，由于他們的核與胞質(zhì)比例不同，而呈現(xiàn)出不同的信號(hào)，借此可把他們區(qū)分開(kāi)來(lái)，光散射（scatter,S)是除了體積和電導(dǎo)性以外，又從細(xì)胞表面光散射的特點(diǎn)提供細(xì)胞類(lèi)型的鑒別方式，來(lái)自激光光源的單色光束直接進(jìn)入計(jì)數(shù)池的敏感區(qū)，在10⁰-70⁰時(shí)對(duì)每一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行掃描分析，提供細(xì)胞結(jié)構(gòu)、形態(tài)的光散射信息。光散射特別具有對(duì)細(xì)胞顆粒的構(gòu)型和顆粒質(zhì)量的區(qū)別能力。細(xì)胞粗顆粒挑散射要雙細(xì)顆粒更強(qiáng)，所以通過(guò)光散射可幫助儀器將粒細(xì)胞分開(kāi)。

根據(jù)以上三種方法檢測(cè)的數(shù)據(jù)，經(jīng)計(jì)算機(jī)處理得出細(xì)胞分布圖（圖示-15)進(jìn)而計(jì)算出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。圖中各圈內(nèi)的范圍均代表正常細(xì)胞和異常細(xì)胞在圖中可能出現(xiàn)的位置，數(shù)字代表細(xì)胞的類(lèi)型。

圖2-15 VCS法細(xì)胞分布圖

1．幼稚細(xì)胞　2．桿狀核粒細(xì)胞

3．單核細(xì)胞　4．單核細(xì)胞或淋巴細(xì)胞

5．淋巴細(xì)胞　6．變異淋巴細(xì)胞

7．小型非典型淋巴細(xì)胞　8．有核紅細(xì)胞

9．巨大血小板　10．血小板凝塊

2．阻抗與射頻技術(shù)聯(lián)合的白細(xì)胞分類(lèi)法這尖儀器白細(xì)胞計(jì)數(shù)通過(guò)四個(gè)不同檢測(cè)系統(tǒng)完成。

（1)嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)：血液進(jìn)入儀器后，經(jīng)分血器使血液與嗜酸性粒細(xì)胞特異計(jì)數(shù)的溶血的劑混合，由于其特殊的PH，使除嗜酸性粒細(xì)胞以外的所有細(xì)胞溶解或萎縮，含有完整的嗜酸性粒細(xì)胞液體的通過(guò)小孔時(shí)，使計(jì)數(shù)電路產(chǎn)生脈沖而被子計(jì)數(shù)。

（2)嗜三性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)：計(jì)數(shù)原理與嗜酸性粒細(xì)胞相同，由于堿性溶血?jiǎng)┲荒鼙Ａ襞c血液中嗜堿性的粒細(xì)胞，因此根據(jù)脈沖的多少即可求得嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)。上述二種方法除需要使用專(zhuān)一的溶血?jiǎng)┩�，還需特定的作用溫度和時(shí)間。

（3)淋巴、單核、粒細(xì)胞（中性、嗜堿性、嗜酸性性)的檢測(cè)系統(tǒng)：這個(gè)系統(tǒng)采用電阻與射頻聯(lián)合檢測(cè)的方式。使用的溶血?jiǎng)┑淖饔幂^輕溶血?jiǎng)┐┩讣?xì)胞膜時(shí)僅使少量的胞質(zhì)溢出，對(duì)核的皺縮作用也較輕微，細(xì)胞形態(tài)改變不大。在小孔的內(nèi)外電級(jí)上存有直流和高頻兩個(gè)放射器，在小孔周?chē)�存在直流電及射頻兩小及顆粒的多少。因此細(xì)胞進(jìn)入小孔時(shí)產(chǎn)生兩個(gè)不同的脈沖信號(hào)，脈站的高低分別代表細(xì)胞的大小和核及顆粒的密度，以DC信號(hào)為橫叢標(biāo)，RF為縱坐標(biāo)，就可根據(jù)2個(gè)信號(hào)把同一個(gè)細(xì)胞定位于二維的細(xì)胞散射圖上。由于淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞及粒細(xì)胞的細(xì)胞大小、細(xì)胞質(zhì)含量，胞質(zhì)內(nèi)顆粒的大小與密度、細(xì)胞核的形態(tài)與密度不同，DC及EF的脈沖信號(hào)有較大的差異，定位在各自散射的區(qū)域，通過(guò)掃描技術(shù)得出各類(lèi)細(xì)胞比例（見(jiàn)圖2-16)。

圖2-16 電阻抗與射頻聯(lián)合檢測(cè)白細(xì)胞分布圖

（4)幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)：此胞膜上脂質(zhì)較成熟細(xì)胞少的現(xiàn)象，在細(xì)胞懸液加入硫化氨基酸后，由于細(xì)胞上脂質(zhì)占位不同，故結(jié)合在幼稚細(xì)胞的硫化氨基酸較成熟的細(xì)胞多，且對(duì)溶血?jiǎng)┯械挚棺饔谩．?dāng)加入溶血?jiǎng)┖�，成熟�?xì)胞被溶解，如果懸液中存在細(xì)胞細(xì)胞，其形態(tài)不受契約壞，因此可通過(guò)電阻抗的方法檢測(cè)出來(lái)。（圖2-17)。

圖2-17電阻抗與射頻聯(lián)合檢測(cè)白細(xì)胞、幼稚細(xì)胞、屏幕細(xì)胞分布圖

3．光散射與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)：聯(lián)合應(yīng)用激光射的過(guò)氧化物酶染色技術(shù)來(lái)進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。嗜酸性粒細(xì)胞有很強(qiáng)的過(guò)氧化物酶活性，中性粒細(xì)胞有較強(qiáng)的過(guò)氧化物酶活性，單細(xì)胞資助之，而淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞均無(wú)此酶。將血興高采烈經(jīng)過(guò)氧化物酶染色后，胞質(zhì)內(nèi)即可出現(xiàn)不同的酶化學(xué)反應(yīng)，由此構(gòu)成了此種血液分析儀的分析基礎(chǔ)，化妝品的分血器將血加入到含有清洗劑和甲醛的高滲液體內(nèi)（21倍稀釋)并孵育（40⁰～70⁰)20秒鐘。其中清洗劑（含有非離子表面活性劑)使細(xì)胞破壞，甲醛使白細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶被固定，此后發(fā)生第二步反應(yīng)，即加入過(guò)氧化氫和4氯=蔡酚，并加熱13秒，此時(shí)如果待測(cè)細(xì)胞質(zhì)中含有過(guò)氧化酶即可分解H₂O₂產(chǎn)生[O]，后者可使4氯-蔡酚顯色并沉積定位于酶反應(yīng)部位，此類(lèi)細(xì)胞通過(guò)測(cè)試區(qū)時(shí)，由于酶反應(yīng)強(qiáng)度不同（陰性、弱陽(yáng)性、強(qiáng)陽(yáng)性)和細(xì)胞體大小不同，激光束射互細(xì)胞上的前向角和散射角有所不同，以X軸為吸光率標(biāo)記（酶反應(yīng)強(qiáng)度)，Y軸為光散射（細(xì)胞大小)。每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的兩個(gè)信號(hào)結(jié)合定位在細(xì)胞圖上（圖2-18)。每秒鐘儀器可測(cè)上千個(gè)細(xì)胞。計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對(duì)存儲(chǔ)的資料進(jìn)行分析處理，并結(jié)合嗜好堿性粒細(xì)胞或分葉核粒細(xì)胞通道結(jié)果計(jì)算出白細(xì)胞總參數(shù)和分類(lèi)良數(shù)。

圖2-18 激光與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)白細(xì)胞直方示意圖

4．多角度偏振光散射白細(xì)胞分類(lèi)技術(shù)（multi — Angle polatised scatter separation of white cell,MAPSS)其原理是一定體積的全血標(biāo)本用鞘流液按適當(dāng)比例稀釋。其白細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，因嗜堿性粒細(xì)胞嘌粒具有吸濕的特性，所以嗜堿性粒細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細(xì)胞內(nèi)部的滲透透壓高于鞘興高采烈的滲透壓而發(fā)生改變，紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白從細(xì)胞內(nèi)游離出來(lái)，而鞘液內(nèi)的水分進(jìn)入紅細(xì)胞中，細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)仍然完整，但此時(shí)的紅細(xì)胞折炮指數(shù)與鞘液的相同，故紅細(xì)胞不干擾白細(xì)胞檢測(cè)。

在水動(dòng)力系統(tǒng)的作用下，樣本被集中為一個(gè)直徑為30μm的小股液流，該液流將稀釋細(xì)胞單個(gè)排列，因是單個(gè)通過(guò)激光束，故在各個(gè)方向都有其散射光�？梢詮乃膫�(gè)角度測(cè)定散射光的密度（見(jiàn)圖2-19)：①0⁰：前角光散射（1⁰～3⁰)粗略地測(cè)定細(xì)胞大小；②10⁰：狹角光散射（7⁰～11⁰)測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其復(fù)雜性的相對(duì)特征；③90⁰：90⁰消偏振光散射（70⁰`～110⁰)，基于顆�？梢詫⒋怪苯嵌鹊钠�振激光消偏振的特性，將嗜酸細(xì)胞從中性粒細(xì)胞和其它細(xì)胞中分離出來(lái)。④90⁰：垂直光散射（70⁰～110⁰)主要對(duì)細(xì)胞內(nèi)部顆粒和細(xì)胞成分進(jìn)行測(cè)量。可以從這四個(gè)角度同時(shí)對(duì)個(gè)白細(xì)胞進(jìn)行測(cè)量，同一種特定的程序自動(dòng)儲(chǔ)存和分析數(shù)據(jù)，將白細(xì)胞分為嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞5種。

圖2-19 MAPSS測(cè)量原理

（二)儀器自動(dòng)化水平的提高

80年代以前，血細(xì)胞分析儀主動(dòng)脈要是半自動(dòng)型。此類(lèi)儀器需要將標(biāo)本經(jīng)機(jī)外預(yù)稀釋后才能檢測(cè)，惚受干擾，隨機(jī)誤差也很大。隨著全自動(dòng)型儀器不斷涌現(xiàn)，血液直接被入血細(xì)胞分析儀后的在機(jī)內(nèi)自動(dòng)稀釋、自動(dòng)加溶血?jiǎng)�、定時(shí)檢測(cè)，提高了儀器的精確度和準(zhǔn)確度。

最近，“聯(lián)合型血液分析系統(tǒng)‘問(wèn)世，這個(gè)系統(tǒng)將先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀、涂片機(jī)、染色下、網(wǎng)織紅細(xì)胞儀串聯(lián)在一起。血液先經(jīng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)，根據(jù)紅細(xì)胞情況決定是否做網(wǎng)織紅計(jì)數(shù)；根據(jù)HCT來(lái)改變推片機(jī)的角度和速度，以保證血涂片的合格。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和直方圖的變化，計(jì)算機(jī)選擇是否需要一步顯微鏡檢查。特別是自動(dòng)加樣系統(tǒng)和真空采血管的應(yīng)用。不但可能避免實(shí)驗(yàn)的隨機(jī)誤差，提高工作效率，而且可避免某些實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)造成的血行感染，對(duì)工作人員的勞動(dòng)保護(hù)起以關(guān)鍵作用，成為儀器發(fā)展和使用的潮流。

（三)各種特殊技術(shù)的應(yīng)用

為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確，不同儀器使用不同的特殊技術(shù)：①為了使細(xì)胞計(jì)數(shù)準(zhǔn)確采用“三次計(jì)數(shù)“表決；②采用熱敏電阻裝置，監(jiān)測(cè)試劑溫度；③為了使積壓小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確，采用流技術(shù)及鞘流；④為同避免小細(xì)胞和大血小板干擾血小板計(jì)數(shù)，采用浮動(dòng)界標(biāo)技術(shù)；⑤儀器自動(dòng)保護(hù)技術(shù)、采用了燃燒電路、管道和過(guò)樣針的自動(dòng)清洗及故障礙自檢功能；⑥各種方式的質(zhì)控制資料儲(chǔ)存和處理（比如X-B質(zhì)控法)。這些技術(shù)對(duì)于質(zhì)量控制起了關(guān)鍵作用。

以上介紹了近年來(lái)五分類(lèi)法血細(xì)胞分儀白細(xì)胞分類(lèi)的原理及臨床應(yīng)用價(jià)值。不難看出，由于高科技的應(yīng)用，使細(xì)胞分析更精確、更準(zhǔn)確，為臨床診斷與治療提供了重要依據(jù)，也大大提高了實(shí)驗(yàn)室工作效率。但應(yīng)指出，各類(lèi)儀器仍有其不足之處，如不能對(duì)單個(gè)細(xì)胞完全識(shí)別，特別是白血病細(xì)胞和正常單核細(xì)胞、異常不典型淋巴細(xì)胞，因?yàn)槲宸诸?lèi)法儀器的白細(xì)胞分類(lèi)只是嚴(yán)格根據(jù)篩選標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果，必要時(shí)仍需以顯微鏡涂片檢查進(jìn)行復(fù)檢。